三種齒科合金誘導(dǎo)L9292細(xì)胞凋亡進(jìn)行Bcl-2家族基因檢測(cè).pdf

1、目的：
　　 生物醫(yī)用材料中的不銹鋼是臨床應(yīng)用中最多,最廣泛的一類材料。新型醫(yī)用高氮無(wú)鎳奧氏體不銹鋼(BIOSSN4高氮無(wú)鎳奧氏體不銹鋼)是中科院金屬研究所新近研制的一種醫(yī)用不銹鋼材料。這種材料優(yōu)良的機(jī)械性能已經(jīng)得到了實(shí)驗(yàn)證實(shí),通過(guò)檢測(cè)Caspase-3的表達(dá)強(qiáng)度來(lái)評(píng)價(jià)新型醫(yī)用高氮無(wú)鎳奧氏體不銹鋼的生物相容性,初步證實(shí)了該種材料符合臨床應(yīng)用材料的生物相容性要求。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)檢測(cè)Bcl-2家族基因的表達(dá)強(qiáng)度來(lái)分析新型醫(yī)用高氮無(wú)鎳奧氏

2、體不銹鋼,進(jìn)一步研究這種合金的生物相容性,以期使之更好的應(yīng)用于臨床。
　　 材料與方法：
　　 1.細(xì)胞培養(yǎng)
　　 用含10%胎牛血清的RPMI1640細(xì)胞培養(yǎng)基在37℃,5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)L929細(xì)胞并傳代。
　　 2.DAPI染色進(jìn)行細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢測(cè)
　　 設(shè)立實(shí)驗(yàn)組(新型醫(yī)用高氮無(wú)鎳奧氏體不銹鋼組),對(duì)照組(317L不銹鋼組,金合金組,空白對(duì)照組)。用4種液體分別培養(yǎng)L929細(xì)胞48h后,

3、進(jìn)行DAPI染色,熒光顯微鏡下觀察細(xì)胞凋亡情況并計(jì)算細(xì)胞凋亡率。
　　 3.Bcl-2及Bax對(duì)合金浸提液的檢測(cè)
　　 實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組用3種合金浸提液及空白對(duì)照組分別培養(yǎng)L929細(xì)胞48h后,進(jìn)行Bcl-2及Bax檢測(cè),流式細(xì)胞儀檢測(cè)熒光強(qiáng)度。
　　 結(jié)果：
　　 1.各組細(xì)胞于合金浸提液中培養(yǎng)48h后,經(jīng)DAPI染色后,經(jīng)熒光顯微鏡觀察均可見(jiàn)凋亡細(xì)胞。
　　 2.各組細(xì)胞在浸提液的作用下48h之

4、后,Bcl-2的熒光表達(dá)強(qiáng)度為:空白對(duì)照組＞金合金組＞新型醫(yī)用高氮無(wú)鎳奧氏體不銹鋼組＞317L不銹鋼組;Bax的熒光表達(dá)強(qiáng)度為:317L不銹鋼組＞新型醫(yī)用高氮無(wú)鎳奧氏體不銹鋼組＞金合金組＞空白對(duì)照組.各組之間熒光表達(dá)強(qiáng)度有顯著性差異(P＜0.05)
　　 結(jié)論：
　　 1.三種材料的生物相容性由好及差依次為:金合金組＞新型醫(yī)用高氮無(wú)鎳奧氏體不銹鋼＞317L不銹鋼。
　　 2.在48h時(shí)間段,各組合金B(yǎng)cl-2的熒