白血病化療耐藥接觸耐藥模型和粘附耐藥模型的建立及機(jī)制初步探討.pdf

1、【目的】收集骨髓標(biāo)本,檢測其中的Fn表達(dá)情況;以急性淋巴系白血病細(xì)胞系Jurkat為研究對象,部分模擬急性淋巴細(xì)胞白血病的骨髓微環(huán)境,觀察Jurkat在與骨髓基質(zhì)細(xì)胞MSCs作用后,對化療藥物吡柔比星藥物敏感性的改變,研究白血病骨髓微環(huán)境介導(dǎo)化療耐藥的部分機(jī)制。
　　【方法】收集骨髓標(biāo)本,檢測不同病例骨髓液標(biāo)本上清中Fn水平的高低;使用CCK-8的方法檢測單獨(dú)培養(yǎng)的Jurkat細(xì)胞對化療藥物吡柔比星的藥物敏感性;體外建立急性淋巴系

2、白血病細(xì)胞系Jurkat與骨髓基質(zhì)細(xì)胞MSCs共培養(yǎng)接觸耐藥模型;體外建立Jurkat細(xì)胞與Fn作用的粘附耐藥模型;使用CCK-8和流式細(xì)胞儀的方法分別檢測Jurkat細(xì)胞在MSCs共培養(yǎng)接觸耐藥模型、Fn粘附耐藥模型、Jurkat細(xì)胞單獨(dú)培養(yǎng)模型中的Jurkat細(xì)胞對化療藥物吡柔比星在相同藥物濃度作用下細(xì)胞凋亡情況的改變;使用流式細(xì)胞儀檢測Jurkat細(xì)胞在MSCs接觸耐藥模型和Fn粘附耐藥模型中細(xì)胞周期阻滯的改變;使用ELISA檢測

3、在MSCs共培養(yǎng)接觸耐藥模型中Fn表達(dá)水平的高低。
　　【結(jié)果】與正常人相比較,血液腫瘤患者的骨髓標(biāo)本上清中所分泌的Fn水平明顯的升高,其結(jié)果有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;ELISA檢測在Jurkat細(xì)胞與MSCs共培養(yǎng)的接觸耐藥模型中收集的上清中存在Fn;在與骨髓基質(zhì)細(xì)胞MSCs共培養(yǎng)接觸耐藥模型中,Jurkat細(xì)胞在相同濃度化療藥物吡柔比星作用下,在同一時間點(diǎn)上,細(xì)胞凋亡數(shù)目較單獨(dú)培養(yǎng)組有明顯下降,結(jié)果具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;在Fn作用的粘附模型中,