槲皮素及其7-OH衍生物對(duì)膀胱癌細(xì)胞的抑制作用及細(xì)胞周期的影響.pdf

1、[目的]通過(guò)體外細(xì)胞試驗(yàn)及建立裸鼠移植瘤模型，研究槲皮素及其7-OH衍生物對(duì)人膀胱癌細(xì)胞株BIU-87的增殖抑制作用及細(xì)胞周期的影響。
　　 [方法]體外實(shí)驗(yàn)：1.96孔板培養(yǎng)BIU-87細(xì)胞，分別加入的槲皮素及槲皮素單硫酸酯鈉鹽(SQMS)，使其終濃度為(12.5～100μmol/L)，收集24h細(xì)胞，MTT實(shí)驗(yàn)測(cè)定吸光值，計(jì)算生長(zhǎng)抑制率及半數(shù)抑制濃度IC50；2.流式細(xì)胞儀分析60μmol/L槲皮素及SQMS作用細(xì)胞后的細(xì)胞

2、周期分布情況。
　　 體內(nèi)實(shí)驗(yàn)：建立BIU-87裸鼠移植瘤動(dòng)物模型：30只BIU-87細(xì)胞株移植成功的裸鼠分為五組，每組6只。A組：NS對(duì)照組；B組：槲皮素組；C組：低劑量SQMS組；D組：中劑量SQMS組；E組：高劑量SQMS組。上述藥物處理15天，觀察各組藥物對(duì)腫瘤的抑制作用。移植瘤標(biāo)本經(jīng)光鏡觀察；免疫組化分析標(biāo)本Ki-67，cyclingB1，cyclingD1表達(dá)情況。
　　 [結(jié)果]1.MTT實(shí)驗(yàn)分析：槲皮素及

3、SQMS對(duì)BIU-87細(xì)胞的抑制率均呈能抑制BIU-87細(xì)胞的增殖，呈一定的濃度和時(shí)間依賴(lài)性。但相同濃度兩者藥物間對(duì)比25μmol/L以下槲皮素比SQMS抑制率高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。但50μmol/L及以上組相同濃度比較雖然槲皮素組抑制率較高，但差異沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
　　 2.PI單染流式細(xì)胞術(shù)分析：60μmol/L的槲皮素及SQMS分別作用BIU-87細(xì)胞24h后，槲皮素使G0/G1期細(xì)胞數(shù)比例

4、下降，G2/M期細(xì)胞比例增加了，S期細(xì)胞無(wú)明顯變化；而SQMS則使G0/G1期細(xì)胞比例上升，G2/M期細(xì)胞比例下降，S期細(xì)胞與對(duì)照相比也有輕微下降。
　　 3.移植瘤實(shí)驗(yàn)：A組裸鼠移植瘤重量明顯大于B、C、D、E組(P<0.01)B、C、D、E組抑瘤率分別為32.62％、36.46％、43.88％、46.49％，B、C組之間的差異無(wú)顯著性意義P>0.05，提示在體實(shí)驗(yàn)中，槲皮素及SQMS均有抑制腫瘤生長(zhǎng)的作用，半數(shù)濃度的SQMS

5、對(duì)腫瘤的抑制作用與槲皮素作用相當(dāng)，SQMS對(duì)腫瘤的抑制呈劑量依賴(lài)性。
　　 4.免疫組化染色結(jié)果：Ki-67標(biāo)記指數(shù)：A組最高，B組與D組之間差異無(wú)顯著性意義P>0.05，提示槲皮素及SQMS均有抑制腫瘤細(xì)胞增殖的作用。CyclingB1免疫組化染色結(jié)果顯示：cyclingB1表達(dá)水平A組高于B、D組。D組比B組下降更明顯，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。CyclingD1免疫組化染色結(jié)果顯示cyclingD1表達(dá)水平A組高于B、D組，B組