多能干細胞中穩(wěn)定表達轉錄因子FoxA2的細胞特性研究.pdf

1、轉錄因子FoxA2是胚胎發(fā)育過程中神經產生的重要調節(jié)因子。研究發(fā)現維甲酸誘導的P19多能性干細胞定向神經分化過程中出現FoxA2的表達。為了進一步探討FoxA2在干細胞向神經分化過程中的作用,我們建立了可以穩(wěn)定表達GFP-FoxA2融合蛋白的P19細胞株-P19-GFP-rFoxA2細胞株。GFP-FoxA2融合蛋白的穩(wěn)定表達導致P19-GFP-rFoxA2細胞中多能性相關基因Nanog和Sox2的表達降低和堿性磷酸酶的活性降低,但不影

2、響多能性基因Oct4的表達;同時,該細胞中神經干細胞標志物Nestin的表達以及Prominin-1陽性細胞數目的增多,說明FoxA2的穩(wěn)定表達促使P19細胞部分喪失干細胞特征并導致神經干細胞特性的出現。另外,P19-GFP-rFoxA2細胞中出現神經細胞分化相關基因NeuroD1的表達。我們證實了FoxA2可以結合NeuroD1的啟動子調節(jié)其活性,說明NeuroD1是FoxA2的下游靶基因。進一步研究發(fā)現:RA誘導P19-GFP-rF