抗菌肽基因合成與植物表達(dá)載體的構(gòu)建.pdf

1、抗菌肽是自然界中的廣泛存在的生物體先天免疫效應(yīng)因子，因其具有廣譜抗菌、殺菌力強(qiáng)、非特異性殺菌、不易使病原體產(chǎn)生抗性等特點(diǎn)而倍受科學(xué)家的關(guān)注。本研究主要從事抗菌肽基因的合成與植物表達(dá)載體的構(gòu)建，為將來應(yīng)用于甘蔗遺傳轉(zhuǎn)化做準(zhǔn)備。本論文主要的內(nèi)容有： 1)設(shè)計(jì)引物利用PCR技術(shù)擴(kuò)增得到抗菌肽基因片段并將其克隆進(jìn)載體，測序結(jié)果表明PCR擴(kuò)增得到的產(chǎn)物因存在缺失、倒置、突變、插入等現(xiàn)象而不能在下一步的實(shí)驗(yàn)中加以利用； 2)將適合單

2、子葉植物遺傳轉(zhuǎn)化的ub i啟動子連接入克隆載體pUC19并兩端測序，證實(shí)本室保存的Ub i啟動子與GENBANK上發(fā)布的序列具有很高的同源性，可以用于植物表達(dá)載體構(gòu)建； 3)用甘蔗偏愛的密碼子設(shè)計(jì)了分泌型抗菌肽基因MS I-99并在其后設(shè)計(jì)了Nos終止子，在全基因合成得到該基因后在其前面連接上Ub i啟動子，將Ubi-MSI-Nos連接到質(zhì)粒pCAMB I 2301的多克隆位點(diǎn)上構(gòu)建得到植物表達(dá)載體; 4)進(jìn)行了甘蔗愈傷