多肽配基定向化固定抗體的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、抗體經(jīng)常被固定在某一固相介質(zhì)表面用于免疫分析,但由于抗體的固定是隨機的,導(dǎo)致固定上的抗體活性并不高。后來有人開發(fā)出一些能讓抗體定向固定在固相介質(zhì)表面的方法。本文正是為了開發(fā)一種新的抗體定向固定方法,主要是利用與抗體IgG的Fc片段具有親和作用的肽配基來實現(xiàn)抗體的定向固定化。
  本文采用分散聚合法合成了表面為環(huán)氧基團的單分散的高分子微球pGMA,通過對環(huán)氧基開環(huán)、環(huán)氧氯丙烷活化、乙二胺改性以及肽配基HWRGWVC的固定化實現(xiàn)了對p

2、GMA微球的表面改性并獲得了具有不同功能基團的pGMA微球。在此基礎(chǔ)上,利用粒度分析儀、掃描電子顯微鏡、紅外光譜和反相色譜對上述微球進行了系統(tǒng)表征。粒度分析結(jié)果表明,制得了約1.6μm的單分散微球,在掃描電子顯微鏡下呈均一球形,且表面光滑無孔。紅外光譜和反相色譜結(jié)果表明各種表面修飾是成功的。IgG靜態(tài)吸附結(jié)果表明,IgG能夠吸附在固定有肽配基的微球表面,吸附容量為3-4 mg/g?;钚詼y定表明肽配基法固定的活性抗體比率(活性抗體/固定抗

3、體)高于化學(xué)EDC法。
  在此基礎(chǔ)上,本文利用乳液聚合法制備了粒徑為110 nm的pGMA納米球,引入EDMA交聯(lián)劑能夠更好地促進納米球在水溶液中的穩(wěn)定性。通過納米球表面氨基的引入,本文成功地將肽配基 HWRGWV偶聯(lián)于納米球表面,合成了具有抗體定向固定功能化的納米球。最后,本文考察了功能化納米球?qū)ωiIgG的吸附行為,進而利用ITC研究了功能化納米球與IgG的相互作用。結(jié)果表明,功能化納米球和氨化納米球均對IgG有吸附作用,但前

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