未甲基化CpG脫氧寡聚核苷酸（CpG ODN）對小鼠脾細胞產(chǎn)生IgE的抑制作用.pdf

1、變態(tài)反應性疾病(allergic disease)是指機體被某種變應原物質(zhì)致敏后，再次與類似變應原性的物質(zhì)接觸后所產(chǎn)生的異?；蜻^強的免疫反應所導致的疾病。本文以小鼠脾細胞IgE的產(chǎn)牛為指標，從不同角度研究了CpG ODN的抑制作用及其可能的機制，使得對CpG ODN的認識更加全面，為臨床治療提供基礎實驗依據(jù)。 材料和方法： 1.取正常雌性BALB/C小鼠，制備單個小鼠脾細胞懸液或純化B細胞懸液，在CpGODN存在或不存在

2、情況下，用IL-4+anti-CD40刺激培養(yǎng)細胞，用ELISA方法檢測培養(yǎng)上清中IgE產(chǎn)生的量，觀察不同時間或不同濃度加入CpG ODN對小鼠脾細胞或純化B細胞產(chǎn)生IgE的影響。在CpG ODN存在的情況下，用IL-4+anti-CD40刺激培養(yǎng)細胞，并分別加入抗IFN-γ或抗lL-12，收集培養(yǎng)7天的細胞上清液，用ELISA方法檢測IgE產(chǎn)生的量，觀察抗IFN-γ或抗IL-12對CpG ODN抑制IgE產(chǎn)生作用的影響。 2.

3、在CpG ODN存在或不存在情況下，用或不用CFSE標記后，再用IL-4+anti-CD40刺激培養(yǎng)細胞，3天后收集細胞，經(jīng)相應熒光抗體染色后，使用流式細胞儀進行分析，觀察CpG ODN對B細胞分裂和活化的影響。 結論： 1.CpG ODN能夠抑制IL-4+anti-CD40刺激小鼠脾細胞和純化B細胞產(chǎn)生IgE，其抑制作用呈劑量依賴性和時間限制性。 2.抗IFN-γ和抗IL-12單克隆抗體不能完全拮抗CpG OD