脫-γ-羧基凝血酶原(Des-γ-carboxy-prothrombin DCP)促進肝細胞癌惡性增殖作用研究.pdf

1、脫-γ-羧基凝血酶原（Des-γ-carboxy-prothrombin， DCP是肝細胞癌（hepatocellular carcinoma， HCC）產(chǎn)生的異常凝血酶原。與正常凝血酶原相比，DCP的分子結(jié)構(gòu)特點是其Gla domain結(jié)構(gòu)域中的一個或多個Glu殘基（Glu residus）沒有被完全羧化（γ-carboxylated）成為Gla，從而失去凝血功能。我們初步認為，DCP已經(jīng)完全喪失正常凝血酶原功能，可能產(chǎn)生許多與肝細胞

2、癌惡性增殖相關(guān)的作用，尤其可能在HCC的發(fā)展、浸潤與轉(zhuǎn)移等方面產(chǎn)生一定的惡性增殖作用。本課題觀察了DCP刺激HCC細胞增殖及促進腫瘤血管生成作用，探討了其產(chǎn)生機制。以免疫熒光法測定了人肝癌HepG-2和SMMC-7721細胞表達DCP水平，證明了人肝癌細胞具有自分泌表達DCP的特性。以MTT法檢測了DCP對HepG-2和SMMC-7721細胞的生長刺激作用。 結(jié)果顯示，DCP對腫瘤細胞有明顯的生長促進作用。將HepG-2和SMM

3、C-7721細胞接種裸鼠，尾靜脈給予DCP，DCP明顯刺激腫瘤組織惡性增殖。DCP與HepG-2和SMMC-7721細胞孵育48小時，以Western blot分析VEGF、bFGF、TGF-α表達水平，DCP明顯刺激上述腫瘤生長因子的表達。同樣方法測定接種裸鼠的HepG-2和SMMC-7721肝癌組織，得到了類似結(jié)果。我們再以CD34表達水平評價腫瘤微血管密度MVD，顯示DCP對人HepG-2和SMMC-7721腫瘤組織微血管密度MV