大鼠心臟驟停心肺復(fù)蘇后腦皮質(zhì)及海馬神經(jīng)細(xì)胞自噬水平的動態(tài)變化.pdf

1、目的：
　　1、按照Utstein模式建立窒息法心臟驟停模型和致顫法心臟驟停模型，比較兩組模型的差異并觀察大鼠自主循環(huán)恢復(fù)后24h組織病理學(xué)變化特點(diǎn)。
　　2、觀察大鼠心臟驟停心肺復(fù)蘇后腦皮質(zhì)及海馬神經(jīng)細(xì)胞自噬水平的動態(tài)變化情況，探討心肺復(fù)蘇后自噬的發(fā)生及其變化規(guī)律。
　　方法：
　　1、分別采用窒息法和致顫法制備大鼠心臟驟停模型，比較兩組大鼠在誘發(fā)心臟驟停時(shí)間、神經(jīng)功能缺損評分、心臟驟停心電圖變化、復(fù)蘇成功率及

2、自主循環(huán)恢復(fù)后24h存活率的差異；并觀察大鼠自主循環(huán)恢復(fù)后24h腦皮質(zhì)及海馬組織病理學(xué)變化特點(diǎn)。
　　2、采用經(jīng)皮電刺激心外膜法建立大鼠心臟驟停模型（致顫法），利用隨機(jī)數(shù)字法將大鼠分為7組：空白對照組僅進(jìn)行麻醉、氣管插管、動靜脈置管等操作，不誘發(fā)心臟驟停（0h組）。采用致顫法制備大鼠心臟驟停復(fù)蘇模型，在恢復(fù)自主循環(huán)后3h，6h，12h，24h，48h，72h各時(shí)間點(diǎn)分別充分麻醉后處死大鼠，取材，透射電鏡下觀察腦組織自噬超微結(jié)構(gòu)變化

3、，采用 Western-blot、免疫組化檢測腦皮質(zhì)及海馬神經(jīng)細(xì)胞自噬相關(guān)蛋白Beclin-1、LC3II的變化。
　　結(jié)果：
　　1、窒息組從窒息開始到出現(xiàn)心臟驟停的間隔時(shí)間為292.7±51.5sec，而致顫組從釋放交流電至出現(xiàn)心臟驟停的間隔時(shí)間為2.5±1.2sec，致顫組誘導(dǎo)心臟驟停時(shí)間較窒息組時(shí)間明顯縮短（P<0.05）；窒息組心電圖表現(xiàn)為心電靜止5例，無脈搏電活動10例，共15例，而致顫組心電圖表現(xiàn)為室顫6例，心

4、電靜止7例，無脈搏電活動2例，共15例；窒息組復(fù)蘇成功6例，自主循環(huán)恢復(fù)后24h存活4例，致顫組復(fù)蘇成功9例，自主循環(huán)恢復(fù)后24h存活6例；采用神經(jīng)功能缺損評分，在12h、24h兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)時(shí)窒息組評分明顯低于致顫組（P<0.05）；HE染色發(fā)現(xiàn)，窒息組較致顫組的神經(jīng)組織損害病理變化更加明顯。
　　2、透射電鏡下觀察致顫法心臟驟停復(fù)蘇模型發(fā)現(xiàn)，自噬體在6h組開始出現(xiàn)，24h組達(dá)高峰，48h組逐漸減少。免疫印跡和免疫組化分別檢測腦皮質(zhì)

5、及海馬神經(jīng)細(xì)胞自噬相關(guān)蛋白 Beclin-1、LC3II含量，與空白對照組（0h）相比，恢復(fù)自主循環(huán)后上述兩種蛋白表達(dá)逐漸升高，24h時(shí)達(dá)峰值，48h及72h時(shí)又有所下降。
　　結(jié)論：
　　1、心臟驟停模型的建立中，致顫法較窒息法誘導(dǎo)心臟驟停所需時(shí)間明顯縮短，其心臟驟停的心電圖類型也更類似于臨床，并且心肺復(fù)蘇成功率及24h存活率也高于窒息法。故此，致顫法是心肺復(fù)蘇較理想的實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ汀?br>　　2、大鼠心臟驟停心肺復(fù)蘇后自噬被