HSP90抑制劑格爾德霉素對胃癌SGC—7901細胞增殖、侵襲能力及B-RAF表達的影響研究.pdf

1、【目的】 研究HSP90抑制劑格爾德霉素對胃癌SGC—7901細胞增殖、侵襲能力及B-RAF表達的影響，探討HSP90在胃癌增殖、凋亡及侵襲轉(zhuǎn)移中的作用及分子機制。 【方法】 1.以不同濃度的格爾德霉素(geldanamycim,GA) (0.20μmol/L、0.40μmol/L、0.80μmol/L、1.60μmol/L、3.20μmol/L)作用于體外培養(yǎng)的人胃癌SGC—7901細胞，在倒置顯微鏡下觀察細胞

2、形態(tài)的變化，應(yīng)用直接細胞計數(shù)法和四氮唑藍比色法(MTT法)描繪細胞生長曲線，檢測GA對人胃癌SGC—7901細胞的抑制增殖作用及其量效和時效關(guān)系。應(yīng)用原位細胞凋亡檢測(TUNEL法)觀察誘導(dǎo)人胃癌SGC—7901細胞的凋亡表現(xiàn)。 2.應(yīng)用Transwell小室檢測GA對人胃癌SGC—7901細胞侵襲及遷移能力的影響。 3.應(yīng)用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)檢測GA作用下人胃癌SGC—7901細胞中B-RAFmRNA及

3、B-RAF蛋白的表達狀況。 【結(jié)果】 1、正常對照組的人胃癌SGC—7901細胞呈良好的貼壁生長狀態(tài)，而經(jīng)GA處理后的人胃癌SGC—7901細胞形態(tài)則發(fā)生了顯著變化：泡化、扭曲、固縮、脫離貼壁生長；GA能明顯抑制體外培養(yǎng)的人胃癌SGC—7901細胞增殖，其細胞增殖抑制率隨GA濃度增高和時間延長而增大。并呈現(xiàn)明顯量效和時效關(guān)系。GA(1.2μmol/L)能有效誘導(dǎo)人胃癌SGC—7901細胞的凋亡。 2.用GA(0.

4、6μmol/L)處理48h后人胃癌SGC—7901細胞的侵襲和遷移能力有明顯下降，同正常對照組相比有顯著差異(P<0.01)。 3.GA(1.2μmol/L)處理48h后人胃癌SGC—7901細胞B-RAFmRNA表達有明顯的下降。同正常對照組相比有顯著差異(P<0.01)。 【結(jié)論】 1.GA能明顯抑制體外培養(yǎng)的人胃癌SGC—7901細胞增殖，呈現(xiàn)明顯的量效和時效關(guān)系，并能有效誘導(dǎo)人胃癌SGC-7901細胞凋亡