桑黃、蠐螬藥用活性成份的分離純化與功能研究.pdf

1、“桑黃”為擔子菌亞門(Basidiomycotina)，層菌綱(Hymenomycetes)，多孔菌目(Polyporales)，銹革孔菌科(Hymenochaetacae)，針層孔菌屬(Phellinus)的真菌，，東亞的國家中已經(jīng)被當作一種傳統(tǒng)的藥使用，用于治療胃腸混亂，降火和淋巴的疾病。特別是它的抗腫瘤活性，桑黃也有許多優(yōu)勢作為抗癌候選藥之一，被人們所關注。 本文的第一部分研究內(nèi)容為從桑黃發(fā)酵液中分離活性成份，尋找具凝集活

2、性、抗菌活性的有機分子，為開發(fā)新的天然藥物作準備。 本實驗通過冷凍干燥、離子交換和HPLC層析等方法，從藥用真菌桑黃的發(fā)酵液中分離純化了一種凝集素，SDS-PAGE檢測其為單一蛋白條帶，分子量約24kDa，與HPLC分析分子量一致，證明該凝集素為單亞基蛋白。SHL可以凝集供試的小鼠血紅細胞和4種血型人血的血紅細胞，但對不同來源的血紅細胞凝集滴度不同。糖抑制實驗表明，SHL不被D-果糖、D-半乳糖、葡萄糖、蔗糖、乳糖所抑制。SHL

3、具有較好的熱穩(wěn)定性且其凝血活性不受Ca2+、Mg2+和Zn2+等二價陽離子的影響。 用相似的處理方法，我們從桑黃發(fā)酵液中分離到一種相對分子質量為20kD的抗真菌生物活性物質。 桑黃已經(jīng)被知道具有各種不同的生物學的活性。但是從鮑氏針層孔菌(Phellinus baumii)提取多糖卻極少被報道。本實驗中水溶性多糖由熱水抽出與菌絲分開，游離蛋白質用Sevage法移除。多糖由陰離子交換和凝膠層析純化。由DEAE-Sephade

4、x-50陰離子交換層析時用0-1.1 M NaCl洗脫。再用純化后，再用Sephadex G-75測定其分子量為17，000D。再測定其各項生物活性，該多糖被發(fā)現(xiàn)顯著地增加巨噬細胞的增殖。同時，可以明顯抑制HepG2細胞和HCT細胞的增殖。本文的第二部分研究內(nèi)容為白星花金龜幼蟲中多糖的提取與純化。 用相似的處理方法，以我國藥用昆蟲白星花金龜(Protaetia brevitarsis)幼蟲(蠐螬)為研究對象，通過勻漿，乙醇沉淀，