2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語(yǔ)一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁(yè)
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1、MicroRNAs(miRNAs)是一類約22個(gè)堿基的小分子非編碼RNA,它廣泛存在于各種真核生物中,通常在轉(zhuǎn)錄后水平負(fù)調(diào)控基因的表達(dá)。在肝癌中,miRNAs在組織中表達(dá)經(jīng)常失調(diào),一些特定的miRNAs與肝癌的轉(zhuǎn)移、復(fù)發(fā)和預(yù)后等臨床病理特征相關(guān)。
  為了研究miRNAs對(duì)肝癌細(xì)胞運(yùn)動(dòng)以及轉(zhuǎn)移的作用,本文利用活細(xì)胞工作站觀察下的創(chuàng)傷修復(fù)實(shí)驗(yàn)篩選人類miRNAs庫(kù)并通過transwell實(shí)驗(yàn)進(jìn)行驗(yàn)證,通過篩選,我們發(fā)現(xiàn)了11個(gè)對(duì)肝癌

2、細(xì)胞SK-Hep-1遷移有調(diào)控作用的miRNAs分子:miR-1247, miR-1244, miR-146b-3p, miR-1471, miR-188-3p, miR-661, miR-891a,miR-891b,miR-767-5p,miR-525-3p和miR-134。進(jìn)一步的研究發(fā)現(xiàn)miR-134在肝癌中表達(dá)下調(diào)且其表達(dá)水平與淋巴結(jié)侵襲和血管侵犯存在負(fù)相關(guān)。與此同時(shí),過表達(dá)miR-134能抑制肝癌細(xì)胞體外和體內(nèi)的侵襲與轉(zhuǎn)移;抑

3、制內(nèi)源性的miR-134可以促進(jìn)肝癌細(xì)胞的遷移和侵襲能力。通過生物信息學(xué)及基因芯片技術(shù)的方法,結(jié)合熒光素酶實(shí)驗(yàn),我們確定了Integrin Beta1(ITGB1)是miR-134的一個(gè)直接靶基因,過表達(dá)ITGB1可以顯著促進(jìn)肝癌細(xì)胞的遷移與侵襲,且ITGB1可以回復(fù)miR-134對(duì)肝癌細(xì)胞遷移和侵襲的抑制作用。
  同時(shí),我們通過TCGA數(shù)據(jù)庫(kù)檢測(cè)了miR-134以及ITGB1在不同腫瘤中的表達(dá)情況。結(jié)果顯示,在肝細(xì)胞肝癌,透明

4、細(xì)胞性腎細(xì)胞癌以及甲狀腺癌樣本中,miR-134表達(dá)下調(diào),而ITGB1表達(dá)上調(diào)。在乳頭狀腎細(xì)胞癌中,miR-134表達(dá)下調(diào),ITGB1的mRNA表達(dá)水平無變化。而在頭頸部鱗狀細(xì)胞癌中,ITGB1表達(dá)上調(diào),miR-134表達(dá)水平無明顯變化。同時(shí)在頭頸部鱗狀細(xì)胞癌中,ITGB1的高表達(dá)與其總生存期負(fù)相關(guān)。
  通過對(duì)細(xì)胞形態(tài)變化的觀察,我們發(fā)現(xiàn)miR-134能夠顯著抑制細(xì)胞應(yīng)力纖維的形成,并降低肝癌細(xì)胞與基質(zhì)的粘附能力。Western

5、 Blot實(shí)驗(yàn)表明miR-134的抑制作用與其降低ITGB1下游FAK的磷酸化水平以及RhoA的激活有關(guān),ITGB1基因的過表達(dá)可以回復(fù)miR-134引起的FAK磷酸化水平下調(diào)以及RhoA的活性降低,這些結(jié)果表明miR-134能夠抑制ITGB1的信號(hào)通路的激活,導(dǎo)致肝癌細(xì)胞遷移和侵襲能力的下降。
  綜上所述,我們通過篩選發(fā)現(xiàn)miR-134能夠抑制肝癌細(xì)胞的遷移、侵襲與轉(zhuǎn)移,ITGB1是受到miR-134直接調(diào)控的功能性靶基因。通

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