siRNAs干擾LMP1對EBV陽性腫瘤細胞的影響及其分子機理的探討.pdf

1、r768182博士學(xué)位論文中山大學(xué)博士學(xué)位論文siRNAs干擾LMPl對EBV陽性腫瘤細胞的影響及其分子機理的探討EffectofsiRNAsTargetingLMPlonEBVPositiveCancerCelllinesanditsMechanism博士生：梅玉屏導(dǎo)師：曾益新教授專業(yè)：腫瘤學(xué)中山大學(xué)腫瘤防治中心椰2005年5月廣州siRNAJ干擾LMPI對EBV陽性腫瘤細囊的影響及其分子機理的撩對博士學(xué)位論文MAPK途徑，P13K／

2、AKT途徑及其他途徑。通過介導(dǎo)不同的信號途徑，LMPl能上調(diào)以下分子表達：A20，CAS，BAK，TNFRI，TRAIL，DAP3，CDl7，CD21，CD23，CD39，CD40，CD44，CASP8，CASP3，ILIO，IL8，BCL2，A20，API，LFAl，MAPK，Ras，ERKl／2，JAK3，NF—kB，LAF3，CDKl，CDK4，CDK6，PCNA，CDC2，ICAMl，CyclinB，CyclinDl，MMP9，

3、EGFR，SURVIVN等；另一方面，LMPI使c—Myc和CDIO表達下降；再一方面，LMPl還可以調(diào)控泛素化蛋白體系。鼻咽癌(nasopharyngealcarcinoma；NPC)是中國南方高發(fā)的惡性腫瘤，尤其是廣東省。鼻咽癌的發(fā)生發(fā)展被認為是環(huán)境因素、遺傳因素和EBV共同作用的結(jié)果。LMPl是鼻咽癌發(fā)病中被認定的病毒癌基因，60％90％的鼻咽癌病例有LMPI的表達，在EBV誘導(dǎo)鼻咽癌的發(fā)生發(fā)展分子機制中，LMPl促進鼻咽癌的增殖

4、介導(dǎo)鼻咽癌分化，與鼻咽癌的轉(zhuǎn)移、侵襲、組織學(xué)分級等有關(guān)。RNAi技術(shù)由于其特有的優(yōu)越性，已廣泛地應(yīng)用于干擾單個基因，整條基因和整個基因組。被迅速應(yīng)用于功能基因組學(xué)、藥物靶點篩選和細胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路分析等方面，該技術(shù)在腫瘤研究中的應(yīng)用主要集中在腫瘤相關(guān)基因的功能研究上，內(nèi)容涉及腫瘤發(fā)生發(fā)展、侵襲與轉(zhuǎn)移、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、細胞周期調(diào)控、凋亡和治療等多方面。RNAi有望開發(fā)為新的腫瘤治療藥物，針對腫瘤細胞特定靶基因的SiRNA可抑制腫瘤細胞生長、誘導(dǎo)凋

5、亡、增強化療或放療的敏感性而發(fā)揮抗癌作用。目前有化學(xué)合成，體外轉(zhuǎn)錄，用RNaseIH家族系列酶制備雙鏈RNA，在細胞內(nèi)用質(zhì)粒或病毒載體來表達siRNAs，在細胞內(nèi)用PCR演變而來的表達框來表達siRNAs等五種不同的方法來制備siRNAs。本文利用RNAi技術(shù)的優(yōu)越性，選擇EBV陽性的淋巴瘤和鼻咽癌細胞株，特異性阻斷LMPl的表達，分析瘤細胞LMPl干擾前后發(fā)生的變化，揭示LMPI在腫瘤發(fā)生發(fā)展中的分子機制，為腫瘤的診斷和治療提供治療靶