高良姜素對LPS誘導THP-1細胞炎癥模型的作用.pdf

1、背景:膿毒癥（sepsis）是感染引起宿主反應失調所導致的危及生命的器官功能障礙，其發(fā)病率和病死率均很高，給人類健康和社會經(jīng)濟發(fā)展造成了巨大的損害。膿毒癥的發(fā)病機制十分復雜，目前仍未完全闡明，其內容涉及炎癥反應、免疫抑制、凝血功能異常、代謝紊亂、神經(jīng)-內分泌系統(tǒng)-免疫調節(jié)網(wǎng)絡失調等方面，但失控的炎癥反應仍然是膿毒癥重要的發(fā)病機制之一。
　　黃酮類化合物是常見的多酚類化合物，廣泛分布于不同種類的植物中，具有廣泛的藥理學活性，包括抗炎

2、、抗腫瘤、抗氧化、保護心血管、保護腦神經(jīng)等。目前已經(jīng)有多種含黃酮類化合物的中草藥應用于臨床治療，顯示出了廣闊的應用前景。高良姜素(G)是黃酮類化合物中的一種。近些年的研究表明其具有抗炎、抗腫瘤、抗氧化、抗纖維化等作用，而且無明顯的毒副作用，但目前其在膿毒癥方面的研究較少，它能否作為膿毒癥的治療藥物仍有待進一步研究。
　　目的:本研究通過LPS誘導人急性單核細胞白血病細胞株(THP-1)構建膿毒癥體外細胞炎癥模型，探討高良姜素對該模

3、型的作用及其可能的機制。
　　內容與方法:
　　1．利用MTS法檢測高良姜素對細胞活力的影響。
　　2．建立LPS誘導下的THP-1細胞炎癥模型，利用酶聯(lián)免疫吸附（ELISA）法檢測不同濃度高良姜素（2.5、5、10、20μM）在不同時間點（6、12小時）對LPS刺激后THP-1細胞釋放炎癥因子TNF-α、MCP-1、IL-1β和IL-6的影響。
　　3．采用Western Blot法研究高良姜素對LPS刺激后T

4、HP-1細胞NF-κB、MAPK通路相關蛋白的影響。
　　4．采用Western Blot法進一步研究高良姜素對LPS刺激后THP-1細胞核轉錄因子NF-κB（P65）轉位的影響。
　　結果:
　　1．高良姜素在20μM范圍內對細胞活力無明顯影響。
　　2．LPS的刺激濃度為500ng/mL時，與LPS組相比，高良姜素2.5-20μM能有效抑制LPS刺激后THP-1細胞炎癥因子TNF-α、MCP-1、IL-1β、

5、IL-6的釋放。
　　3．高良姜素能抑制LPS刺激后THP-1細胞內NF-κB通路p-IκBα蛋白的表達，同時使IκBα的表達增加，但對MAPK通路相關蛋白的表達無影響。
　　4．高良姜素能夠減少LPS刺激后THP-1細胞內轉錄因子NF-κB（P65）的核轉位。
　　結論:
　　1．高良姜素能夠抑制LPS刺激THP-1細胞后炎癥因子TNF-α、MCP-1、IL-1β、IL-6的釋放。
　　2．高良姜素對LP