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1、 本課題優(yōu)化了黃芪多糖的提取工藝,并首次將中藥多糖同疫苗抗原相結(jié)合到一起,以提高疫苗的保護(hù)作用。1.用正交試驗(yàn)篩選苯酚-硫酸法測(cè)定黃芪多糖的最佳條件2.黃芪多糖的提取工藝最佳條件的選擇3.將中藥多糖與疫苗結(jié)合,制備含中藥多糖佐劑的疫苗供試樣品經(jīng)過(guò)多次試驗(yàn),最后確定制備含中藥多糖佐劑的疫苗供試樣品的工藝。4.中藥多糖佐劑對(duì)雞NDⅣ系疫苗抗原活力影響的試驗(yàn)通過(guò)測(cè)定疫苗的半數(shù)感染量(EID50)和疫苗在CEF中增殖的變化來(lái)檢測(cè)疫苗的抗原
2、活力,結(jié)果供試組和對(duì)照組的EID50并無(wú)明顯差別,證明多糖類成分對(duì)雞NDⅣ系疫苗的抗原活力無(wú)明顯抑制作用。5.中藥多糖佐劑對(duì)雞NDⅣ系疫苗的免疫增強(qiáng)作用取1日齡健康易感蛋用雛雞120只,平均分為6組,常規(guī)飼養(yǎng),7日齡測(cè)定ND抗體水平,每組分別免疫雞NDⅣ系疫苗供試樣品或?qū)φ掌?羽份/只,16日齡再免疫一次。于首次免疫后7、14、21、28、35天每組取5只雞,心臟采血,測(cè)定ND抗體效價(jià),并于14、28、42日齡測(cè)定淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率,結(jié)果黃
3、芪多糖組在21、28兩日,香菇多糖組在21日ND抗體水平高于對(duì)照組,差異顯著(P<0.05),其它組無(wú)差異或差異不顯著;T淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率的測(cè)定結(jié)果為黃芪多糖和香菇多糖能明顯提高14、28、42日齡雛雞T淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率,由此證明中藥多糖與雞NDⅣ系疫苗結(jié)合,仍然可以具有免疫增強(qiáng)作用。本課題研究結(jié)果證明,經(jīng)優(yōu)化的黃芪多糖提取工藝制備的黃芪多糖可以作為動(dòng)物用疫苗佐劑使用,且工藝簡(jiǎn)單,成本較低,可以推廣;中藥多糖類成分以一定比例加入凍干保護(hù)劑中
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