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1、從本實(shí)驗(yàn)室構(gòu)建的家蠶蛹cDNA文庫中獲得一段cDNA序列，通過blast比對，發(fā)現(xiàn)它含有一個CMC保守結(jié)構(gòu)域，我們將其命名為BmCMC。CMC蛋白在真核生物細(xì)胞內(nèi)普遍存在，并且高度保守，但是關(guān)于其功能研究的報道非常少。這個B.CMC基因含有2個外顯子，1個內(nèi)含子，ORF為35.bp，編碼含有118個氨基酸殘基的蛋白，稱之為BmCMC，預(yù)測分子量為13.5.kDa，等電點(diǎn)為8.98。我們利用大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)成功表達(dá)了含有His標(biāo)簽的BmC
2、MC融合蛋白，分子量合計(jì)為17.3.kDa。用HiTra.Chelatin.HP親和層析柱純化融合的目的蛋白，經(jīng)FPLC反相柱層析進(jìn)一步純化，然后進(jìn)行質(zhì)譜分析，得到該融合蛋白的分子量為17.4.kDa，證實(shí)了該蛋白表達(dá)的正確性。用得到的融合目的蛋白為抗原免疫1只雄性的新西蘭大白兔，制備該融合蛋白的多克隆抗體。ELISA間接法檢測該抗血清(多克隆抗體)的效價可達(dá)到1:16000以上。用制備的多克隆抗體通過Wester.blotting檢測
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