解淀粉芽孢桿菌PEBA20抗菌活性相關(guān)基因的檢測及調(diào)控基因spoOA突變株的初步構(gòu)建.pdf

1、植物內(nèi)生生防細(xì)菌作為生物防治因子具有良好的應(yīng)用前景。生防細(xì)菌可以通過多種生防機制發(fā)揮對植物的保護和促生作用，包括產(chǎn)生抗菌活性物質(zhì)來抑制病原物對宿主植物組織的侵害。在芽孢桿菌中，這些抗菌活性物質(zhì)的合成不僅需要相關(guān)的編碼基因進行編碼，更需要一些重要的調(diào)控因子發(fā)揮全局調(diào)控作用，協(xié)調(diào)細(xì)菌抗菌活性、生物膜形成和運動性等多種細(xì)胞進程。
　　 本文主要研究結(jié)果如下：
　　 首先，從BacillusamyloliquefaciensPE

2、BA20中檢測到了10種與抗菌活性物質(zhì)相關(guān)的基因，并對其序列和在芽孢桿菌中的發(fā)現(xiàn)情況進行了分析。分別把這幾種抗菌活性相關(guān)基因的序列同GenBank提交的其他芽孢桿菌中類似基因進行比對，相似度均在66％-99％之間，且與同種芽孢桿菌的相似度普遍較高，但在不同種芽孢桿菌中序列的差異較大。幾種抗菌活性相關(guān)基因在芽孢桿菌中分布廣泛，多數(shù)芽孢桿菌都存在一種以上的抗菌活性物質(zhì)編碼基因。PEBA20中存在所檢測的10抗菌活性物質(zhì)的編碼和調(diào)控基因，可能

3、與其發(fā)揮生防活性有直接的關(guān)聯(lián)。
　　 其次，成功克隆了B.amyloliquefaciensPEBA20中的spoOA基因，獲得了完整序列，測序結(jié)果表明，該基因含有801個堿基的開放閱讀框，編碼266個氨基酸，堿基和氨基酸序列同GenBank中提交的其它芽孢桿菌種spoOA類似基因都具有很高的同源性，且與同種芽孢桿菌同源性最高。
　　 再次，設(shè)計了合理可行的突變株構(gòu)建方案，初步構(gòu)建了spoOA基因的突變株。目前已經(jīng)得到了