靶向VEGF-siRNA抑制人肝癌細(xì)胞HepG2裸鼠成瘤的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、原創(chuàng)性l聲明本人聲明，所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。盡我所知，除了論文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得南華大學(xué)或其他單位的學(xué)位或證書而使用過的材料。與我共同工作的同志對本研究所作的貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明。作者簽名：菇日期：妒9年譬月腳關(guān)于學(xué)位論文使用授權(quán)說明本人同意南華大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，即：學(xué)校有權(quán)保留學(xué)位論文，允許學(xué)位

2、論文被查閱和借閱；學(xué)校可以公布學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容，可以采用復(fù)印、縮印或其它手段保留學(xué)位論文；學(xué)校可根據(jù)國家或湖南省有關(guān)部門規(guī)定送交學(xué)位論文。作者簽名：伊堯?qū)熀灻海P期：紗‘7年夕月Ⅸ日j18398A抑制人肝癌細(xì)胞HepG2裸鼠成瘤的實(shí)驗(yàn)研究中文摘要目的：探討人肝癌細(xì)胞血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)干擾質(zhì)粒(psuperretroneo—VEGFsiRNA)對人肝癌細(xì)胞株HepG2裸鼠移植瘤生長的靶向抑制作用。方法：利用已設(shè)計(jì)并

3、合成好的特異性靶向VEGF的siRNA片段，構(gòu)建HepG2／psuperretroneoVEGFsiRNA表達(dá)載體，并將其轉(zhuǎn)入HepG2細(xì)胞。通過G418抗性篩選出穩(wěn)定株，移植裸鼠成瘤，同時(shí)設(shè)立對照組。根據(jù)體積的均數(shù)值繪制腫瘤生長曲線，以HE染色法觀察質(zhì)粒處理后瘤組織的病理改變，Western—blot檢測腫瘤組織中VEGF的表達(dá)變化，免疫組化SP法檢測瘤組織內(nèi)微血管密度。結(jié)果：成功建立人肝癌細(xì)胞株HepG2裸鼠移植瘤模型，HepG2／

4、psuperretroneoVEGF—siRNA組與HepG2／psuperretroneo組、HepG2組相比，腫瘤生長受到抑制，腫瘤體積較小，成瘤潛伏期明顯延長(PO05)；瘤重抑制率為6901％，明顯高于HepG2／psuperretroneo組和HepG2組(P001)；病理學(xué)檢查發(fā)現(xiàn)HepG2／psuperretroneo—VEGF—siRNA組癌細(xì)胞較少，異型性小，免疫組化標(biāo)記微血管密度(MVD)明顯下降(PO05)，而He

5、pG2／psuperretroneo組、HepG2組癌細(xì)胞多，異型性大，且血管豐富；Westernblot分析表明：HepG2／psuperretroneo—VEGF—siRNA組與HepG2／psuperretroneo組、HepG2組相比，瘤組織內(nèi)VEGF蛋白表達(dá)明顯下調(diào)(P005)。結(jié)論：l、成功建立人肝癌細(xì)胞株HepG2／psuperretroneoVEGFsiRNA裸鼠移植瘤模型2、構(gòu)建的HepG2／psuperretrone