溫度和黃瓜花葉病毒對(duì)煙蚜種群系統(tǒng)的影響.pdf

1、煙蚜Myzuspersicae(Sulzer)又名桃蚜，是我國(guó)各煙區(qū)煙草上的主要害蟲之一，也是傳播黃瓜花葉病毒(CucumberMosaicVirus，CMV)的主要媒介昆蟲。以重慶煙區(qū)為例，2003年，僅煙蚜造成的直接和間接經(jīng)濟(jì)損失2000多萬元，嚴(yán)重制約了重慶煙區(qū)煙葉生產(chǎn)。近幾年來的調(diào)查研究表明，黃瓜花葉病毒(CMV)在我國(guó)煙區(qū)為害成逐年上升的趨勢(shì)。本文對(duì)重慶武隆煙區(qū)煙草上的CMV病原進(jìn)行了分離和鑒定，并從溫度、煙草CMV病株對(duì)煙蚜

2、種群生命參數(shù)的影響，煙草CMV病株對(duì)煙蚜體內(nèi)主要解毒酶、靶標(biāo)酶和水解酶以及對(duì)煙蚜體內(nèi)一些能源物質(zhì)的影響等幾方面研究了溫度、煙草CMV病株對(duì)煙蚜種群系統(tǒng)的作用。獲得了以下主要研究結(jié)果：1武隆煙區(qū)煙草黃瓜花葉病毒病(CMV)病原的分離和鑒定利用CMV的鑒別寄主心葉煙和枯斑寄主莧色藜對(duì)煙草上的CMV進(jìn)行了分離，并用鑒別寄主譜、間接ELISA和RT-PCR法對(duì)分離的CMV進(jìn)行了生物學(xué)、血清學(xué)和分子鑒定，建立了CMV實(shí)驗(yàn)室毒源。在進(jìn)行病毒鑒定時(shí)，

3、分離出的待測(cè)病毒在普通煙、心葉煙、三生煙、K326、黃瓜和番茄上呈現(xiàn)花葉癥狀，葉片扭曲畸形、上卷并伸長(zhǎng)呈鼠尾狀；在莧色藜、昆諾藜呈現(xiàn)局部枯斑癥狀。待側(cè)病毒樣品OD＞0.5，樣品OD/陰性對(duì)照OD＞2。提取的總RNA純度較高，進(jìn)行PCR特異擴(kuò)增，成功獲得了長(zhǎng)度約為757bp的DNA片段。這表明待測(cè)病毒為黃瓜花葉病毒(CMV)。 2溫度及煙草CMV病株對(duì)煙蚜生長(zhǎng)發(fā)育的影響在19℃、22℃、25℃、28℃和31℃恒溫條件下，對(duì)比研究了

4、煙草CMV病株和健康煙株與煙蚜M.persica生長(zhǎng)發(fā)育和繁殖的關(guān)系。研究表明，隨著溫度的升高，在健康煙株和煙草CMV病株葉碟飼養(yǎng)條件下，煙蚜的成蟲壽命和世代歷期都顯著縮短，繁殖力減弱。19℃時(shí)煙蚜的成蟲壽命和世代歷期最長(zhǎng)，31℃時(shí)最短。煙草CMV病株對(duì)煙蚜存活率和繁殖力有顯著影響，與健康煙草相比，煙草CMV病株造成煙蚜成活率降低。煙蚜取食煙草CMV病株時(shí)，在19℃條件下其產(chǎn)仔量最大為36.9頭，31℃最小為2.17頭；凈增殖率R0在1

5、9℃時(shí)最大，在31℃時(shí)最?。恢芟拊鲩L(zhǎng)率λ和內(nèi)稟增長(zhǎng)率rm在25℃時(shí)最大，在31℃時(shí)最小；世代平均周期T在31℃時(shí)最小，在19℃時(shí)最大；種群加倍時(shí)間t在25℃時(shí)最小，在31℃時(shí)最大。研究結(jié)果說明，溫度和煙草CMV病株對(duì)煙蚜的生長(zhǎng)發(fā)育和繁殖有顯著影響，25℃的健康煙草最適合煙蚜的生長(zhǎng)。 3.煙草CMV病株對(duì)煙蚜幾種酶系的影響3.1煙草CMV病株對(duì)煙蚜體內(nèi)CarE的影響采用微量滴度酶標(biāo)板法對(duì)兩種飼養(yǎng)條件下煙蚜CarE活性進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果

6、顯示，煙草CMV病株上飼養(yǎng)的煙蚜CarE比活力高于健康煙苗上飼養(yǎng)的煙蚜，其比活力是健康煙株上飼養(yǎng)的煙蚜CarE比活力的1.95倍。 3.2煙草CMV病株對(duì)煙蚜體內(nèi)磷酸酯酶的影響兩種飼養(yǎng)條件下煙蚜酸性磷酸酯酶(ACP)的比活力測(cè)定結(jié)果表明，取食煙草CMV病株的煙蚜比活力較取食健康煙草的煙蚜顯著減小，比值為0.71。堿性磷酸酯酶(ALP)的比活力測(cè)定結(jié)果顯示，取食煙草CMV病株的煙蚜比活力較取食健康煙草的煙蚜顯著減小，比值為0.56

7、。 3.3煙草CMV病株對(duì)煙蚜GSTS、SOD和CAT的影響對(duì)兩種飼養(yǎng)條件下煙蚜GSTs、SOD和CAT活性進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果顯示，在煙草CMV病株和健康煙草上飼養(yǎng)的煙蚜GSTs比活力分別為0.442μmol/(mg·min)和0.507μmol/(mg·min)，因此，取食煙草CMV病株煙蚜GSTs的活性較低。煙草CMV病株上的煙蚜SOD活力和CAT活力明顯高于健康煙草上的煙蚜，差異達(dá)顯著水平。 3.4煙草CMV病株對(duì)煙蚜

8、AChE的影響對(duì)兩種飼養(yǎng)條件下煙蚜體內(nèi)的乙酰膽堿酯酶(AChE)活性進(jìn)行測(cè)定，煙草CMV病株和健康煙草上飼養(yǎng)的煙蚜乙酰膽堿酯酶比活力分別為1.3726OD/(min·mgpro)和1.0180OD/(min·mgpro)，差異達(dá)顯著水平。結(jié)果表明，煙蚜取食煙草CMV病株后乙酰膽堿酯酶活性增強(qiáng)。 4煙草CMV病株對(duì)煙蚜體內(nèi)甘油三酯和多糖的影響煙草CMV病株和健康煙草上飼養(yǎng)的煙蚜體內(nèi)甘油三酯的貯存量分別為86.3034±2.7341

9、μg/頭和145.5734±0.0574μg/頭。經(jīng)過獨(dú)立樣本t測(cè)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)兩種煙蚜內(nèi)甘油三酯含量差異達(dá)到了顯著水平。體內(nèi)多糖的貯存量差異也達(dá)到了極顯著水平，取食煙草CMV病株和健康煙草的煙蚜體內(nèi)多糖分別為9.0814±0.5230μg/頭和6.6064±0.1344μg/頭。 5四種病毒抑制劑防治煙草黃瓜花葉病室內(nèi)藥效試驗(yàn)室內(nèi)進(jìn)行4種病毒抑制劑防治煙草黃瓜花葉病藥效試驗(yàn)，結(jié)果表明，所選的四種藥劑在接種CMV前施藥防治煙草黃瓜花葉