肝炎檢測系列_第1頁
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文檔簡介

1、病毒性肝炎病毒性肝炎是由多種肝炎病毒引起的以肝臟炎癥和壞死病變?yōu)橹鞯囊唤M傳染病.。主要通過糞口、血液和體液而傳播。臨床以疲乏、食欲減退、肝腫大、肝功能異常為主要表現(xiàn)。部分病例出現(xiàn)黃疸,無癥狀感染常見。因其病原不同而分為甲、乙、丙、丁、戊、己和庚七型。(一)甲肝(HAV)的實驗室診斷1、抗—HAVIgM檢測常用捕捉夾心ELISA法檢測。該抗體的檢出具有確診意義,一般在臨床癥狀出現(xiàn)后,患者血清中抗—HAVIgM陽性,1~~~3個星期達高峰,

2、1~~~2個月內(nèi)含量下降,1~~~3個月左右轉(zhuǎn)陰,故抗—HAVIgM陽性,尤其滴度較高(>1000)時,常表明為急性HAV感染或復(fù)發(fā)。2、抗—HAVIgG抗—HAVIgG較抗—HAVIgM晚一周,可持續(xù)數(shù)年或終生。(二)乙型肝炎(HBV)的實驗診斷1、HbsAgHbsAg多用固相放射免疫分析和ELISA檢測。HbsAg是乙肝最先出現(xiàn)的病理標志物,在急性肝炎的潛伏期即可出現(xiàn)陽性,其檢測結(jié)果有助于乙肝的診斷,據(jù)此采取及時措施,對減少輸血后肝

3、炎、控制乙肝的母嬰傳播有經(jīng)濟意義。2、抗—HBs抗—HBs方法同HbsAg的檢測,其陽性顯示機體曾受乙肝病毒感染并產(chǎn)生相應(yīng)的抗體,抗—HBs對HBV的侵襲具有免疫力,被認為是保護性抗體。3、HbeAgHbeAg采用雙抗體夾心ELISA法檢測。它是乙肝傳染性的標志,檢測其有助于HbeAg攜帶者傳染性強弱,母嬰傳播的危險率及急性乙肝的預(yù)后等。4、抗—Hbe為HbeAg刺激機體產(chǎn)生的非保護性抗體。HbeAg消失和抗—Hbe的出現(xiàn)顯示乙肝病情的

4、好轉(zhuǎn),但不能作為無傳染性的指標,也不一定是對機體有益的標志(甲胎蛋白與之有相關(guān)性)。當HbeAg陽性同時出現(xiàn)了抗—Hbe,大部分患者生化指標趨于正常,臨床病情穩(wěn)定。但此時多有HBVDNA與肝細胞的整合,病理進程并未停止。因此臨床上由于HBV感染所致的肝硬化和肝癌患者,有較高的HbeAg和抗—Hbe同時存在的陽性率。HBV拉米夫定耐藥檢測臨床意義拉米夫定耐藥檢測臨床意義一、一、項目名稱:項目名稱:HBV拉米夫定耐藥檢測拉米夫定耐藥檢測二、

5、檢測方法:熒光二、檢測方法:熒光PCR三、概述:三、概述:拉米夫定(Lamivudine,3TC)全稱是2`,3`雙脫氧3`硫胞嘧啶核苷((1)βL2`,3`deoxy3`thiacytidine),是一種核苷類似物,拉米夫定被吸收后在細胞內(nèi)磷酸化,形成拉米夫定(3TC)的5`三磷酸鹽(3TCTP),主要為抑制病毒復(fù)制時必需的逆轉(zhuǎn)錄酶活性。目前認為拉米夫定抑制病毒復(fù)制的機制可能有三種:(1)3TCTP與磷酸脫氧胞嘧啶核苷(dCTP)競爭

6、HBV和HCV等多聚酶的三磷酸核苷結(jié)合部位;(2)3TCTP導(dǎo)致HBV和HCV等反轉(zhuǎn)錄酶、多聚酶的不可逆性及劑量依賴性抑制;(3)3TCTP競爭性摻入延伸的DNA,因它缺乏3`羥基而使復(fù)制的病毒DNA鏈終止。3TC僅抑制病毒DNA的復(fù)制量及其復(fù)制中間體的產(chǎn)量,而對病毒RNA、病毒抗原和已形成的共價閉環(huán)、超螺旋結(jié)構(gòu)的病毒DNA無作用。HBV及其抗原自肝細胞內(nèi)的徹底清除,要靠機體自身的特異性免疫清除及病毒抗原的自然半衰期。拉米夫定作為新一代

7、核苷類高效抗乙肝病毒藥物,可迅速降低HBVDNA的濃度,改善肝臟組織的病變,還可能阻止纖維化的進程,終止肝硬化的發(fā)展,尤其是拉米夫定不受人種、病毒感染的模式、野生型或基因組前C區(qū)突變的影響。該藥與干擾素合用有協(xié)同作用。但是,長期服用拉米夫定會引起HBV基因突變而造成耐藥,其中95%是由于HBV基因組P區(qū)中高度保守的YMDD功能區(qū)(Y酪氨酸—M甲硫氨酸—D天冬氨酸D天冬氨酸)發(fā)生突變:第552位甲硫氨酸(M)被纈氨酸(V)或異亮氨酸(I)

8、代替,突變后的HBV稱為YVDD變異株和YIDD變異株。由于變異造成基因組核苷酸與DNA多聚酶的結(jié)合能力有降低,通常變異株的復(fù)制能力低于野生株。當停止應(yīng)用拉米夫定治療后,野生株通常會替代變異株。當HBV對拉米夫定耐藥時,繼續(xù)應(yīng)用拉米夫定仍能抑制野生株,但變異株因耐藥能進行增殖,臨床上血清ALT水平可能出現(xiàn)暫時上升,并有輕度乏力、惡心等肝臟炎癥損傷加劇等癥狀。有研究表明:拉米夫定耐藥的平均發(fā)生率為24%,用藥一年YMDD變異株發(fā)生率為12

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