羅田甜柿(diospyroskakithunb.)酵母雜交cdna文庫(kù)構(gòu)建及dkpdc2啟動(dòng)子文庫(kù)篩選

1、分類號(hào) 密級(jí)華中農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文羅田甜柿( D i o s p y r o s k a k i T h u n b ．) 酵母雜交e D N A文庫(kù)構(gòu)建及D k P D C 2 啟動(dòng)子文庫(kù)篩選C o n s t r u c t i o no f Y e a s t H y b r i d c D N A L i b r a r y a n d L i b r a r yS r e e n i n gb y D k P D C 2 P

2、 r o m o t e r i nL u o t i a n T i a n s h iP e r s i m m o n ( D i o s p y r o s k a M T h u n b ．)研究生 ：李慧學(xué)號(hào) ：2 0 1 3 3 0 5 1 1 0 0 5 1指導(dǎo)教師 ：羅正榮教授指導(dǎo)小組 ：李國(guó)懷教授胡春根教授劉繼紅教授康春穎教授專業(yè)：果樹學(xué) 研究方向：生物技術(shù)與種質(zhì)創(chuàng)新獲得學(xué)位名稱：農(nóng)學(xué)碩士 獲得學(xué)位時(shí)間：2 0 1

3、6 年6 月華中農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝林學(xué)學(xué)院園藝植物生物學(xué)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室二。一六年六月羅田甜柿( D i o s p y r o sk a k i T h u n b ．) 酵母雜交c D N A 文庫(kù)構(gòu)建及D k P D C 2 啟動(dòng)子文庫(kù)篩選目 錄摘要????????????????????????????????????????????。iA b s t r a c t ??????????????????．??????????????

4、???．??????．．i i i縮略詞表???????????????????????????????．．v1 前言????????????????????????????????．．11 ．1 課題的提出???????????????????????????11 ．2 前人研究進(jìn)展??????????????????????????21 ．2 ．1 柿單寧研究進(jìn)展???????????????????????21 ．2 ．2 柿單寧

5、凝固效應(yīng)研究進(jìn)展??????????????????．31 ．2 ．3 植物基因啟動(dòng)子結(jié)構(gòu)分析??????????????????．51 ．2 ．4 酵母單雜交系統(tǒng)??????????????????????．61 ．3 本課題研究?jī)?nèi)容????????????????????????．1 02 材料與方法?????????????????????????????1 12 ．1 試驗(yàn)材料??????????????????????????

6、??1 12 ．2 試驗(yàn)方法???????????????????????????．．1 12 ．2 ．1 基因全長(zhǎng)擴(kuò)增???????????????????????1 12 ．2 ．2 啟動(dòng)子克隆????????????????????????．1 32 ．2 ．3c D N A 文庫(kù)的建立?????????????????????．1 62 ．2 ．4 載體構(gòu)建及文庫(kù)篩選????????????????????2 23 ．1 總R

7、N A 提取和質(zhì)量檢測(cè)?????????????????????．2 73 ．2 總D N A 提取和質(zhì)量檢測(cè)?????????????????????2 73 ．3 不同品種A D H 和P D C 全長(zhǎng)擴(kuò)增?????????????????．．2 83 ．3 ．1 不同品種A D H 基因e D N A 全長(zhǎng)擴(kuò)增?????????????．2 83 ．3 ．2 不同品種P D C 基因c D N A 全長(zhǎng)擴(kuò)增????????????

8、?．2 93 ．4 不同品種A D H 和P D C 基因啟動(dòng)子克隆??????????????．2 93 ．5 ‘羅田甜柿’酵母雜交c D N A 文庫(kù)構(gòu)建??????????????．3 l3 ．5 ．1m R N A 分離與質(zhì)量檢測(cè)???????????????????3 13 ．5 ．2e D N A 文庫(kù)( U n c u t 型) 質(zhì)量檢測(cè)??????????????．．3 23 ．5 ．3 酵母雜交A D ．c D N A

9、 文庫(kù)質(zhì)量檢測(cè)??????????????3 33 ．6 酵母單雜交文庫(kù)篩選??????????????????????．．3 43 ．6 ．1p P D C 2 ．A b A i 載體構(gòu)建???????????????????．．3 43 ．6 ．2Y 1 H G o l d [ p P D C 2 一A b A i ] 誘餌菌株構(gòu)建?????????????3 43 ．6 ．3 最低A b A 抑制濃度篩選?????????????