共軛亞油酸甘油酯檢測技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)研究.pdf

1、目的：本研究旨在制備出高純度的共軛亞油酸甘油三酯（CLA-TG）、1,3-共軛亞油酸甘油二酯（1,3-CLA-DG）、1,2-共軛亞油酸甘油二酯（1,2-CLA-DG）和共軛亞油酸甘油一酯（CLA-MG），為共軛亞油酸甘油酯的定性定量檢測提供對(duì)照品。建立共軛亞油酸甘油酯的高效液相色譜-蒸發(fā)光散射檢測器（HPLC-ELSD）檢測方法。
　　方法：以富含亞油酸的紅花籽油為原料，用堿異構(gòu)化方法將其中的亞油酸轉(zhuǎn)化成共軛亞油酸，并用尿素包合

2、法對(duì)共軛亞油酸進(jìn)行純化。以脂肪酶Novozyme435為催化劑，在無溶劑體系下催化共軛亞油酸與甘油進(jìn)行酯化反應(yīng)生成共軛亞油酸甘油酯。采用柱層析法、薄層色譜法和液相制備色譜法對(duì)共軛亞油酸甘油酯進(jìn)行分離、純化，制備出了高純度的CLA-TG、1,3-CLA-DG、1,2-CLA-DG、CLA-MG對(duì)照品。采用紅外光譜法、氣相色譜法、液相色譜法對(duì)四種共軛亞油酸甘油酯對(duì)照品進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定和純度分析。采用HPLC-ELSD法，通過優(yōu)化色譜柱、流動(dòng)相、

3、檢測器參數(shù)等條件，建立共軛亞油酸甘油酯分析方法。
　　結(jié)果：堿異構(gòu)化合成共軛亞油酸并用尿素包合法純化后制備出了含量高達(dá)95%的共軛亞油酸，酶法合成共軛亞油酸甘油酯后進(jìn)一步分離、純化制備出了 CLA-TG、1,3-CLA-DG、1,2-CLA-DG、CLA-MG對(duì)照品。紅外光譜顯示四種共軛亞油酸甘油酯的結(jié)構(gòu)中都含有羰基、C=C-C=C共軛雙鍵、順式CHR=CHR’和反式CHR=CHR’等基團(tuán)，氣相色譜法檢測得出四種共軛亞油酸甘油酯中

4、CLA的含量均達(dá)到了99%，液相色譜法檢測得出四種共軛亞油酸甘油酯的純度均達(dá)到了99%。本研究建立的共軛亞油酸甘油酯的HPLC-ELSD法線性相關(guān)性好，檢測時(shí)間短，四種共軛亞油酸甘油酯的檢出限分別為0.06、0.20、0.20、0.25 mg/kg，定量限分別為0.6、1.2、1.2、1.2 mg/kg，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差在1.46%~4.71%之間。
　　結(jié)論：成功制備出了高純度的CLA-TG、1,3-CLA-DG、1,2-CLA-D