不同油脂對(duì)氧化應(yīng)激、內(nèi)皮細(xì)胞功能和腸道菌群的影響.pdf

1、目的:1.研究不同油脂對(duì)小鼠血脂、氧化應(yīng)激和內(nèi)皮細(xì)胞功能的影響，以探討油脂與心血管健康之間的關(guān)系，豐富油脂與健康研究資料，為相關(guān)油脂的進(jìn)一步開發(fā)和應(yīng)用提供參考資料。
　　2.用餐后脂代謝實(shí)驗(yàn)觀察24度棕櫚油和豆油的混合油與豆油之間的差異，為棕櫚油的應(yīng)用提供基礎(chǔ)資料。
　　3.為了研究不同油脂對(duì)腸道菌群的影響，豐富油脂與腸道菌群的研究資料，為相關(guān)油脂的進(jìn)一步開發(fā)和應(yīng)用提供參考資料，為指導(dǎo)日常生活油脂的選擇提供科學(xué)依據(jù)。

2、　　方法:1.采用C57BL/6小鼠，每組12只，分為8組，其中七組為45％供能比的高脂飼料干預(yù)，油脂分別為豬油、酯交換油、大豆油、24度棕櫚油、33度棕櫚油、大豆油∶棕櫚油(0.9∶1)混合油、橄欖油。正常對(duì)照組為正常飼料喂養(yǎng)。干預(yù)周期為12周，試驗(yàn)結(jié)束時(shí)采血，處死動(dòng)物，將脂肪組織保存于福爾馬林水溶液中。測(cè)定血清中血脂，氧化應(yīng)激、內(nèi)皮細(xì)胞功能等指標(biāo)。
　　2.在東南大學(xué)丁家橋校區(qū)招募該校年齡在18～45歲健康成人志愿者30人。對(duì)

3、研究對(duì)象進(jìn)行兩次不同負(fù)荷膳的餐后脂代謝試驗(yàn)，每次實(shí)驗(yàn)間隔一個(gè)月。先采用含有大豆油∶棕櫚油(0.9∶1)混合油的流質(zhì)膳食，受試者經(jīng)4周洗脫期后，再進(jìn)行第二次餐后代謝試驗(yàn)，采用含有大豆油的流質(zhì)膳食。禁食12h后，采集空腹非抗凝血樣，然后受試者在5分鐘內(nèi)將流質(zhì)負(fù)荷膳喝完，分別采集餐后2、4、6小時(shí)血液樣品。測(cè)定血清中血脂，氧化應(yīng)激、內(nèi)皮細(xì)胞功能等指標(biāo)。
　　3.第一部分動(dòng)物試驗(yàn)結(jié)束后，處死動(dòng)物，采集結(jié)腸內(nèi)的殘留排泄物，提取排泄物中DNA

4、，用16S rDNA擴(kuò)增子測(cè)序技術(shù)進(jìn)行測(cè)序，進(jìn)行OTUs聚類和物種分類分析。
　　結(jié)果:1.試驗(yàn)小鼠長(zhǎng)期高脂飼料攝入引起了血清中總膽固醇(TC)和甘油三酯(TG)水平的升高。各實(shí)驗(yàn)組血清TC水平均高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.05）;橄欖油組血清TC水平低于33度棕櫚油組和酯交換油組且有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)。各實(shí)驗(yàn)組的血清TG水平除橄欖油組外均高于對(duì)照組(P＜0.05);橄欖油組血清TG水平低于豬油組(P＜0.05)

5、。氧化應(yīng)激指標(biāo)中血清丙二醛(MDA)水平各實(shí)驗(yàn)組均高于對(duì)照組（P＜0.05）;橄欖油組和豆油組血清MDA水平低于豬油組(P＜0.05)。血清內(nèi)皮素水平除豆油組外其余實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組相比存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，高于對(duì)照組(P＜0.05);，豆油組血清內(nèi)皮素水平低于豬油組和33度棕櫚油組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。血清8-異前列腺素、腫瘤壞死因子、白細(xì)胞介素、GSH-PX、假血友病、E-選擇素等氧化應(yīng)激和內(nèi)皮細(xì)胞功能的指標(biāo)在所有組別之間均沒有

6、統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　2.兩組餐后血清TG變化趨勢(shì)組間有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.001)。豆油組的血清TG隨時(shí)間有持續(xù)增高趨勢(shì)，而混合油組在2小時(shí)后先升高，隨后在4小時(shí)下降，在6小時(shí)與豆油組的血清TG水平達(dá)到一致。餐后血清TC、血清HDL-C、血清MDA、血清SOD、血清NO、血清內(nèi)皮素、血清載脂蛋白B的變化趨勢(shì)組間均沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　3.在放線菌門中，對(duì)照組和大豆油∶棕櫚油(0.9∶1)混合油組之間有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(q val

7、ue＜0.05)，混合油組的放線菌門水平高于對(duì)照組。在疣微菌門中對(duì)照組分別與豬油組和33度棕櫚油組之間有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(q value＜0.01)，豬油組和33度棕櫚油組的疣微菌門水平高于對(duì)照組。
　　結(jié)論:1.相比其它油脂，橄欖油具有一定降低血脂的作用。相比豬油，豆油和橄欖油均不易增加機(jī)體氧化作用，豬油更易導(dǎo)致機(jī)體的氧化應(yīng)激水平升高。相比高飽和的脂肪酸含量高的油脂，多不飽和脂肪酸和單不飽和脂肪酸含量高的油脂都不易增加機(jī)體的氧化應(yīng)

8、激作用。飽和脂肪酸含量較高的豬油和33度棕櫚油都具有一定的促進(jìn)內(nèi)皮素生成的作用，富含多不飽和脂肪酸的豆油對(duì)內(nèi)皮索的釋放有抑制作用。
　　2.人群實(shí)驗(yàn)中豆油組與大豆油∶棕櫚油(0.9∶1)混合組的MDA等氧化應(yīng)激指標(biāo)和內(nèi)皮素等內(nèi)皮細(xì)胞功能的指標(biāo)均沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，這和第一章中動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的結(jié)果相一致，因此24度棕櫚油在與豆油的混合使用中有一定的應(yīng)用前景。
　　3.C18∶0可能是油脂中引起疣微菌群異常的關(guān)鍵因素，長(zhǎng)期的高飽和脂肪膳食