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文檔簡介
1、目的:
探討IL-37通過促進巨噬細胞M2型極化在H/R誘導的肝細胞損傷中的保護作用及其相關分子機制。
方法:
實時熒光定量PCR和Western blot檢測IL-37 mRNA和蛋白在不同極化類型的人單核巨噬細胞THP-1中的表達情況。通過慢病毒轉(zhuǎn)染構(gòu)建穩(wěn)定過表達IL-37的細胞株,實時熒光定量PCR檢測CD206和CD86 mRNA表達情況,流式細胞術(shù)檢測CD163、CD86蛋白表達情況。通過tran
2、swell法將THP-1細胞與人肝細胞LO2細胞共培養(yǎng)并構(gòu)建H/R模型,CCK-8法及流式細胞術(shù)檢測LO2細胞存活率及凋亡率,ELISA檢測細胞培養(yǎng)液中ALT和AST含量,HE染色觀察細胞形態(tài)變化。Western blot檢測THP-1細胞中STAT6及其磷酸化蛋白表達水平。
結(jié)果:
M2型巨噬細胞中IL-37 mRNA及蛋白表達上調(diào)。IL-37促進巨噬細胞M2型極化。IL-37誘導的M2型巨噬細胞與LO2細胞共培養(yǎng)
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