解毒通絡(luò)保腎法對(duì)高糖刺激下足細(xì)胞PI3K-Akt信號(hào)通路活化及凋亡相關(guān)因子的影響.pdf

1、目的:本實(shí)驗(yàn)采用血清藥理學(xué)方法，探討解毒通絡(luò)保腎含藥血清對(duì)體外培養(yǎng)的高糖誘導(dǎo)的足細(xì)胞ILK表達(dá)、調(diào)節(jié)PI3K/Akt信號(hào)通路及對(duì)凋亡相關(guān)因子的影響，探討解毒通絡(luò)保腎中藥干預(yù)高糖刺激下足細(xì)胞損傷發(fā)生機(jī)制，進(jìn)一步為解毒通絡(luò)保腎法治療DN提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　方法:建立高糖誘導(dǎo)的足細(xì)胞模型。體外足細(xì)胞模型+藥物干預(yù)因素。A組:正常糖組;B組:高糖組;C組:高糖+低劑量藥物血清組;D組:高糖+中劑量藥物血清組;E組:高糖+高劑量藥物血清組。

2、酶聯(lián)免疫法檢測(cè)ILK、Akt、Bax、Bcl-2、Caspase-3表達(dá)水平。流式細(xì)胞儀檢測(cè)足細(xì)胞凋亡率。
　　結(jié)果:實(shí)驗(yàn)一:通過(guò)酶聯(lián)免疫檢測(cè)結(jié)果顯示:與A組相比，B、C、D、E組ILK表達(dá)均增加(P＜0.05)，與B組相比，C、D、E組ILK表達(dá)均降低，C組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，D、E組有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);與A組比較，B、C、D、E組Akt表達(dá)均降低(P＜0.05)，而與B組對(duì)比，C、D、E組Akt表達(dá)增加，E

3、組有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，C、D組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　實(shí)驗(yàn)二:與A組相比，B、C、D、E組Bax、Caspase-3表達(dá)均增加(P＜0.05)，與B組相比，C、D、E組Bax表達(dá)均降低，C組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，D、E組有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，C、D、E組Caspase-3表達(dá)均降低(P＜0.05);與A組比較，B、C、D、E組Bcl-2表達(dá)均減少(P＜0.05)，而與B組對(duì)比，C、D、E組Bc

4、l-2表達(dá)增加，C組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，D、E組有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。流式細(xì)胞儀檢測(cè)足細(xì)胞凋亡率結(jié)果顯示:與A組相比，B、C、D、E組細(xì)胞凋亡率均增加(P＜0.01)，與B組相比，C、D、E組細(xì)胞凋亡率降低(P＜0.01)，與C組相比，D組E組凋亡率降低(P＜0.01)。
　　結(jié)論:1、解毒通絡(luò)保腎法對(duì)高糖刺激下足細(xì)胞損傷的保護(hù)機(jī)制可能是通過(guò)阻斷ILK介導(dǎo)的PI3K/Akt信號(hào)通路，抑制Bax和Caspase-3