長(zhǎng)鏈非編碼RNA SPRY4-IT1對(duì)髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞株增殖及侵襲轉(zhuǎn)移的影響.pdf

1、髓母細(xì)胞瘤是兒童小腦最常見(jiàn)的侵襲性胚胎性腫瘤,約占兒童小腦腫瘤的40％，兒童顱內(nèi)腫瘤的20％[1]。由于髓母細(xì)胞瘤對(duì)放、化療敏感,腫瘤手術(shù)切除后行放、化療仍是髓母細(xì)胞瘤主要的治療方法,但過(guò)度放、化療對(duì)兒童聽(tīng)力、認(rèn)知能力、內(nèi)分泌及血管系統(tǒng)造成嚴(yán)重?fù)p害并有繼發(fā)性惡性腫瘤的副作用,腫瘤遠(yuǎn)期生存率及生活質(zhì)量較差[2][3]，5年無(wú)進(jìn)展長(zhǎng)期生存率不到70%[4]。因此，深入探討髓母細(xì)胞瘤發(fā)生發(fā)展的分子機(jī)制對(duì)髓母細(xì)胞瘤的早期診治及改善預(yù)后具有重要的

2、意義。
　　在真核生物體內(nèi)存在著大量的無(wú)編碼蛋白能力的RNA，這些不具有編碼蛋白能力的RNA中，其核苷酸鏈長(zhǎng)度＞200nt為長(zhǎng)鏈非編碼RNA[5](Long non-coding RNA，LncRNA)。近年來(lái)關(guān)于LncRNA的研究進(jìn)展迅速，SPRY4-IT1(基因號(hào)AK024556)作為L(zhǎng)ncRNA家族的一員也受到越來(lái)越多的關(guān)注，其在膠質(zhì)瘤中高表達(dá)與膠質(zhì)瘤細(xì)胞的增殖、遷移密切相關(guān)[6]，但SPRY4-IT1是否在髓母細(xì)胞瘤中也發(fā)

3、揮著相似作用，目前尚未見(jiàn)相關(guān)報(bào)道。本研究旨在體外觀(guān)察SPRY4-IT1對(duì)髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞株生物學(xué)功能的影響，為其用于臨床治療髓母細(xì)胞瘤提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　目的：
　　探討長(zhǎng)鏈非編碼RNA SPRY4-IT1對(duì)髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞株增殖及侵襲轉(zhuǎn)移的影響。
　　方法：
　　髓母細(xì)胞瘤Daoy細(xì)胞分為對(duì)照組和si-SPRY4-IT1組，分別利用脂質(zhì)體Lipofectamine2000將陰性對(duì)照熒光序列和SPRY4-IT1-si

4、RNA轉(zhuǎn)入細(xì)胞中，采用Real-time PCR檢測(cè)轉(zhuǎn)染后各組細(xì)胞中SPRY4-IT1的表達(dá)情況，CCK-8實(shí)驗(yàn)及平板克隆形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞增殖能力的變化，以細(xì)胞Transwell實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞侵襲、遷移能力的變化，Western blot檢測(cè)SPRY4-IT1對(duì)基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP）-2和MMP-9蛋白的影響。
　　結(jié)果：
　　si-SPRY4-IT1組SPRY4-IT1 mRNA表達(dá)水平、細(xì)胞體外增殖能力、細(xì)胞侵襲、遷移能