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文檔簡介
1、目的:
采用RNA干擾技術(RNAi)使得長鏈非編碼RNA SPRY4-IT1及SKA2基因沉默,闡述長鏈非編碼RNA SPRY4-IT1對人膠質瘤細胞增殖和侵襲性的相關影響。
方法:
采用實時定量逆轉錄-聚合酶鏈反應(qRT-PCR)及蛋白免疫印跡法(Western-blot)檢測正常腦組織、人膠質瘤組織、人膠質瘤細胞株及相關處理細胞中長鏈非編碼RNA SPRY4-IT1、SKA2基因的表達狀況,采用RN
2、Ai技術構建相關細胞模型,利用噻唑藍比色法(MTT)檢測細胞增殖活力,克隆形成實驗檢測細胞克隆形成能力,劃痕實驗及Transwell方法檢測膠質瘤細胞的遷移及侵襲能力。觀察并探究長鏈非編碼RNA SPRY4-IT1及SKA2基因對人膠質瘤細胞增殖活力、成瘤能力及細胞侵襲性的相關影響。
結果:
與正常腦組織相比,不同級別的人腦膠質瘤中長鏈非編碼RNA SPRY4-IT1及SKA2的表達均有上升,并且隨膠質瘤級別的上升S
3、PRY4-IT1及SKA2表達水平也隨之升高。采用RNAi技術使得長鏈非編碼RNA SPRY4-IT1沉默后能夠使得人腦膠質瘤細胞的增殖、遷移及侵襲能力均受到不同程度的抑制。進一步的研究顯示長鏈非編碼RNA SPRY4-IT1與SKA2基因在人膠質瘤中的表達呈正相關,并且敲除掉SKA2基因之后也能使得人膠質瘤細胞的增殖、遷移及侵襲能力受到抑制。
結論:
長鏈非編碼RNA SPRY4-IT1能通過上調SKA2基因的表達
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