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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:
采用RNA干擾技術(shù)(RNAi)使得長(zhǎng)鏈非編碼RNA SPRY4-IT1及SKA2基因沉默,闡述長(zhǎng)鏈非編碼RNA SPRY4-IT1對(duì)人膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖和侵襲性的相關(guān)影響。
方法:
采用實(shí)時(shí)定量逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(qRT-PCR)及蛋白免疫印跡法(Western-blot)檢測(cè)正常腦組織、人膠質(zhì)瘤組織、人膠質(zhì)瘤細(xì)胞株及相關(guān)處理細(xì)胞中長(zhǎng)鏈非編碼RNA SPRY4-IT1、SKA2基因的表達(dá)狀況,采用RN
2、Ai技術(shù)構(gòu)建相關(guān)細(xì)胞模型,利用噻唑藍(lán)比色法(MTT)檢測(cè)細(xì)胞增殖活力,克隆形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞克隆形成能力,劃痕實(shí)驗(yàn)及Transwell方法檢測(cè)膠質(zhì)瘤細(xì)胞的遷移及侵襲能力。觀察并探究長(zhǎng)鏈非編碼RNA SPRY4-IT1及SKA2基因?qū)θ四z質(zhì)瘤細(xì)胞增殖活力、成瘤能力及細(xì)胞侵襲性的相關(guān)影響。
結(jié)果:
與正常腦組織相比,不同級(jí)別的人腦膠質(zhì)瘤中長(zhǎng)鏈非編碼RNA SPRY4-IT1及SKA2的表達(dá)均有上升,并且隨膠質(zhì)瘤級(jí)別的上升S
3、PRY4-IT1及SKA2表達(dá)水平也隨之升高。采用RNAi技術(shù)使得長(zhǎng)鏈非編碼RNA SPRY4-IT1沉默后能夠使得人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞的增殖、遷移及侵襲能力均受到不同程度的抑制。進(jìn)一步的研究顯示長(zhǎng)鏈非編碼RNA SPRY4-IT1與SKA2基因在人膠質(zhì)瘤中的表達(dá)呈正相關(guān),并且敲除掉SKA2基因之后也能使得人膠質(zhì)瘤細(xì)胞的增殖、遷移及侵襲能力受到抑制。
結(jié)論:
長(zhǎng)鏈非編碼RNA SPRY4-IT1能通過(guò)上調(diào)SKA2基因的表達(dá)
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