煙熏對(duì)肝細(xì)胞自噬與代謝酶表達(dá)的調(diào)控機(jī)制.pdf

1、目的：香煙中含4000余種有毒化學(xué)物質(zhì)，幾乎對(duì)人體所有器官有毒害作用。臨床上，吸煙主要的后果包括慢性氣道疾病、增加各種癌癥的罹患率、增加心血管事件的發(fā)生率。而且，吸煙可能加快了有腎臟或胰腺疾患病人纖維化進(jìn)展的比率。盡管以上后果不能認(rèn)為是吸煙的結(jié)局，但是吸煙可能對(duì)以上疾病的發(fā)生率、嚴(yán)重性以及一系列肝臟疾患如原發(fā)性膽汁性肝硬化、慢性肝炎、非酒精性脂肪性肝病和原發(fā)性肝癌起到消極作用。肝臟是人體的關(guān)鍵器官之一，能夠有效清除毒物、代謝酒精及一些藥

2、物。肝臟的這些功能有賴(lài)于肝臟細(xì)胞表達(dá)細(xì)胞色素P450酶這種亞鐵血紅素家族。煙熏誘導(dǎo)肝臟代謝酶改變的潛在機(jī)制十分復(fù)雜，有待研究。本研究中，旨在通過(guò)建立煙熏大鼠模型強(qiáng)調(diào)煙霧對(duì)肝臟中炎癥反應(yīng)、自噬活性、核受體及Cyps表達(dá)的影響。
　　方法：
　　1.建立煙熏大鼠模型，采用隨機(jī)數(shù)字表法將30只大鼠隨機(jī)分為2組（每組15只）：煙熏組和對(duì)照組。
　　2.大鼠肺臟及肝臟組織病理切片進(jìn)行蘇木素-伊紅( HE)染色，觀察形態(tài)學(xué)改變。<

3、br>　　3.通過(guò)熒光實(shí)時(shí)定量 PCR法測(cè)定肝組織中炎癥因子、Cyps、NF-κB、核受體mRNA相對(duì)表達(dá)量。
　　4.使用熒光實(shí)時(shí)定量PCR法測(cè)定肝臟細(xì)胞自噬相關(guān)因子mRNA相對(duì)表達(dá)量。
　　結(jié)果：
　　1.煙熏大鼠模型：病理學(xué)觀察示煙熏組大鼠肺體積增大、氣道上皮排列相對(duì)紊亂、部分小氣道上皮增生，炎性細(xì)胞浸潤(rùn)并伴有少量平滑肌增生；肺泡腔擴(kuò)大、肺泡間隔部分?jǐn)嗔?；煙熏組較對(duì)照組肺病理評(píng)分明顯增高、肺平均內(nèi)襯間隔增寬，平均

4、肺泡細(xì)胞數(shù)減少。
　　2.肝臟的病理形態(tài)學(xué)改變：煙熏組大鼠 HE染色的肝組織與對(duì)照組相比沒(méi)有發(fā)生明顯的結(jié)構(gòu)改變。
　　3.炎癥介質(zhì)mRNA相對(duì)表達(dá)量的改變：煙熏組大鼠肝組織IL-1βmRNA相對(duì)表達(dá)量較對(duì)照組升高，但I(xiàn)L-6、TNFαmRNA相對(duì)表達(dá)量與對(duì)照組比無(wú)明顯差異。4.NF-κB mRNA相對(duì)表達(dá)量的改變：煙熏組大鼠肝組織NF-κB mRNA相對(duì)表達(dá)量較對(duì)照組升高。
　　5.核受體 mRNA相對(duì)表達(dá)量的改變：煙

5、熏組大鼠肝組織 PXR、GR mRNA相對(duì)表達(dá)量較對(duì)照組下調(diào)，CAR mRNA相對(duì)表達(dá)量與對(duì)照組相比無(wú)明顯差異。6. Cyps mRNA相對(duì)表達(dá)量的改變：煙熏組大鼠肝組織 Cyp1A2、Cyp2D4、Cyp3A2 mRNA相對(duì)表達(dá)量較對(duì)照組下降；Cyp2C9、2C19 mRNA相對(duì)表達(dá)量與對(duì)照組相比無(wú)明顯差異。
　　7.細(xì)胞自噬相關(guān)因子mRNA相對(duì)表達(dá)量的改變：煙熏組與對(duì)照組相比，細(xì)胞自噬阻斷劑 mTOR mRNA表達(dá)無(wú)顯著下降；

6、然而，mTOR負(fù)向調(diào)節(jié)因子 Ampk mRNA表達(dá)是上調(diào)的，且mTOR正向調(diào)節(jié)因子Wip1 mRNA表達(dá)下調(diào)。煙熏組較對(duì)照組，Atg5、Atg12 mRNA無(wú)顯著差異，Ulk1、Anx3 mRNA表達(dá)量是明顯增加的。
　　結(jié)論：本研究中，建立煙熏大鼠模型強(qiáng)調(diào)煙草煙霧對(duì)肝臟中炎癥反應(yīng)、細(xì)胞自噬活性、核受體及Cyps mRNA表達(dá)的影響。我們發(fā)現(xiàn)，吸煙誘導(dǎo)的炎癥反應(yīng)通過(guò)影響核受體表達(dá)調(diào)控藥物代謝酶Cyps mRNA表達(dá)下調(diào)；煙熏誘導(dǎo)的