組蛋白H3精氨酸單ADP核糖基化對LOVO細(xì)胞侵襲能力的影響及機(jī)制研究.pdf

1、目的：探討組蛋白H3精氨酸單ADP核糖基化對人結(jié)腸癌LOVO細(xì)胞侵襲能力的影響及分子機(jī)制。
　　方法：本研究將未轉(zhuǎn)染LOVO細(xì)胞（未轉(zhuǎn)染組）和慢病毒空載體轉(zhuǎn)染LOVO細(xì)胞（空載體組）設(shè)為對照組，精氨酸點(diǎn)突變?yōu)楸彼岬穆《据d體轉(zhuǎn)染LOVO細(xì)胞（Arg117Ala組）和精氨酸點(diǎn)突變?yōu)橘嚢彼岬穆《据d體轉(zhuǎn)染LOVO細(xì)胞（Arg117Lys組）設(shè)為實(shí)驗(yàn)組。Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)觀察各組LOVO細(xì)胞的侵襲能力。 Western blo

2、t測定各組細(xì)胞H3K9me2、Runx3、β-catenin和MMP7的表達(dá)變化；定量PCR檢測Runx3的mRNA水平。
　　結(jié)果：
　?。?）組蛋白H3精氨酸單ADP核糖基化對LOVO細(xì)胞侵襲能力的影響：Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)檢測對照組與實(shí)驗(yàn)組的侵襲能力，結(jié)果顯示，與對照組相比，Arg117Ala組和Arg117Lys組降解Matrigel基質(zhì)膠穿過小室的細(xì)胞數(shù)明顯減少（P＜0.01）。Arg117Ala組和Arg1

3、17Lys組無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）。
　?。?）組蛋白H3精氨酸單ADP核糖基化影響LOVO細(xì)胞侵襲能力的分子機(jī)制：Western blot方法檢測未轉(zhuǎn)染組、空載體組、Arg117Ala組和Arg117Lys組LOVO細(xì)胞H3K9me2、Runx3、β-catenin和MMP7的表達(dá)情況，結(jié)果顯示，與對照組相比，Arg117Ala組與Arg117Lys組H3K9me2、β-catenin和 MMP7蛋白表達(dá)降低，Runx3蛋

4、白表達(dá)升高（P＜0.01），Arg117Ala組與Arg117Lys組無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）。定量 PCR方法檢測未轉(zhuǎn)染組、空載體組、Arg117Ala組和 Arg117Lys組 LOVO細(xì)胞 Runx3的 mRNA水平，結(jié)果顯示，與對照組相比， Arg117Ala組與Arg117Lys組Runx3的mRNA水平升高（P＜0.01）。Arg117Ala組與Arg117Lys組無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）。
　　結(jié)論：組蛋白H