重組溶瘤腺病毒對人腫瘤細胞的體內(nèi)、外抑制作用研究.pdf_第1頁
已閱讀1頁,還剩53頁未讀, 繼續(xù)免費閱讀

下載本文檔

版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進行舉報或認(rèn)領(lǐng)

文檔簡介

1、近年來我國癌癥的發(fā)病率和死亡率逐年攀升,嚴(yán)重威脅著人類健康及生命。據(jù)統(tǒng)計僅2015年中國新增癌癥患者人數(shù)約為429.2萬,死亡人數(shù)約為281.4萬。目前臨床上多采用手術(shù)和放化療法治療癌癥,但因上述療法缺乏對腫瘤細胞的特異性,導(dǎo)致治療過程中正常細胞也嚴(yán)重受損,因此急需探索腫瘤治療的新方法?;蛑委熓且环N惡性腫瘤的生物療法,但關(guān)鍵問題是如何安全高效地將治療基因遞送至人體內(nèi)。目前腫瘤基因治療中腺病毒載體應(yīng)用最廣泛,溶瘤腺病毒的優(yōu)勢是僅殺傷腫瘤

2、細胞但不傷害正常細胞,因此可作為一種抗腫瘤基因藥物加以應(yīng)用。凋亡素(Apoptin)是雞貧血病毒VP3基因編碼的一種功能蛋白,僅在腫瘤細胞內(nèi)復(fù)制;血凝素-神經(jīng)氨酸酶(HN)是新城疫病毒的一種表面蛋白,能激活細胞凋亡途徑。因此本研究構(gòu)建表達Apoptin和HN的重組腺病毒Ad-VT(Ad-Apoptin-hTERTp-E1a)和Ad-HP(Ad-HN-PEG3p-E1a),研究其是否能成為有效的抗腫瘤基因藥物。
  本研究分別用Ad

3、-VT感染人骨肉瘤和正常細胞,以及用Ad-HN-PEG3p-E1a感染人胃癌細胞。通過MTT法檢測重組腺病毒對腫瘤細胞和正常細胞的增殖抑制率。體外實驗中,在熒光顯微鏡下觀察腫瘤細胞和正常細胞經(jīng)AO/EB染色、DAPI染色后的形態(tài)學(xué)變化;再利用Annexin V/PI方法通過流式細胞術(shù)和染色分析重組腺病毒對腫瘤細胞的抑制作用方式,并通過Caspase酶活性檢測以上重組腺病毒對腫瘤細胞的抑制作用途徑。體內(nèi)實驗中,采取構(gòu)建動物模型并考察腫瘤生

4、長趨勢和平均生存期。
  Ad-VT和Ad-HN-PEG3p-E1a能抑制兩種腫瘤細胞增殖,并伴隨一定的時間效應(yīng)和劑量效應(yīng)關(guān)系,但對正常細胞無影響。體外實驗中驗證了以上兩種重組腺病毒能誘導(dǎo)腫瘤細胞凋亡,且是通過激活Caspase相關(guān)酶方式實現(xiàn)的。體內(nèi)實驗中,Ad-VT和Ad-HN-PEG3p-E1a能有效減緩瘤體生長并能延長平均生存期。
  結(jié)果表明,Ad-VT(Ad-Apoptin-hTERTp-E1a)和Ad-HP(Ad

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

最新文檔

評論

0/150

提交評論