基于Cre-loxP系統(tǒng)誘導(dǎo)刪除抗生素基因植物表達載體的構(gòu)建.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、隨著轉(zhuǎn)基因作物種植面積的擴大和商業(yè)化程度的加深，轉(zhuǎn)基因作物的安全性也受到了人們的關(guān)注。2007年，全球轉(zhuǎn)基因作物種植面積增長率達12％，達到1.143億h㎡(2.824億英畝)，種植轉(zhuǎn)基因作物的國家增加到了23個。但是存在于轉(zhuǎn)基因植物中的具有抗生素或除草劑抗性的標記基因是否會對環(huán)境及人類健康有不良影響和損害引起了廣泛關(guān)注，因此轉(zhuǎn)基因植物中標記基因的剔除成為亟待解決的問題。 本研究利用Cre/loxP系統(tǒng)和受化學(xué)誘導(dǎo)的GR系統(tǒng)，將

2、GR LBD結(jié)構(gòu)域序列與Cre重組酶基因結(jié)合形成融合基因，之后與抗潮霉素標記基因一起插入到兩個同向loxP位點內(nèi)，構(gòu)建形成基于Cre/loxP系統(tǒng)誘導(dǎo)刪除抗生素基因的表達載體。為了穩(wěn)定整個載體的結(jié)構(gòu)、防止Cre重組酶基因在原核生物中表達，將擬南芥隱花色素1(Cry1)的內(nèi)含子(Intron-346)插入到重組酶基因中。同時為了降低重組酶基因表達產(chǎn)物對植物的毒害作用，載體構(gòu)建過程中選用表達量較低的Pnos來調(diào)控重組酶基因。本研究已完成了基

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