鈦顆粒介導(dǎo)的滑膜成纖維樣細(xì)胞HIF-α-RANKL-OPG信號(hào)通路在關(guān)節(jié)假體無(wú)菌性松動(dòng)中的作用研究.pdf

1、背景:
　　磨損顆粒誘導(dǎo)的骨溶解是關(guān)節(jié)假體無(wú)菌性松動(dòng)的主要原因。參與這一復(fù)雜生物學(xué)效應(yīng)的細(xì)胞包括巨噬細(xì)胞、破骨細(xì)胞、骨（成骨）細(xì)胞、滑膜成纖維樣細(xì)胞（fibro-like synoviocytes FLSs）、淋巴細(xì)胞等。顆粒引起的慢性炎癥反應(yīng)，導(dǎo)致假體周?chē)M織內(nèi)巨噬細(xì)胞聚集，趨化因子，細(xì)胞因子等釋放最終激活RANKL-OPG信號(hào)通路并誘導(dǎo)破骨細(xì)胞分化成熟造成骨的吸收是假體松動(dòng)的發(fā)生的研究共識(shí)。假體周?chē)M織長(zhǎng)期處于相對(duì)缺氧狀態(tài)，H

2、IF-1α的表達(dá)對(duì)細(xì)胞缺氧耐受的建立至關(guān)重要。有研究表明HIF-1α的表達(dá)骨發(fā)育及骨折愈合中血管長(zhǎng)入也起著重要的促進(jìn)作用。前期通過(guò)免疫組織化學(xué)染色發(fā)現(xiàn)界膜中大量的RANKL、OPG以及HIF-1α的表達(dá)，推測(cè)界膜中HIF-1α與RANKL-OPG信號(hào)通路存在相互作用，并與假體無(wú)菌性松動(dòng)密切相關(guān)。
　　目的:
　　建立體外關(guān)節(jié)假體無(wú)菌性松動(dòng)界膜的滑膜成纖維樣細(xì)胞模型。研究鈦金屬顆粒誘導(dǎo)松動(dòng)界膜中滑膜成纖維樣細(xì)胞HIF-1α表達(dá)

3、和RANKL/OPG信號(hào)通路活化情況及兩者的相關(guān)性，探究HIF-1α與RANKL-OPG信號(hào)通路在假體無(wú)菌性松動(dòng)中的作用。
　　方法:
　　收集健康成人的滑膜組織，分離提取人滑膜成纖維樣細(xì)胞，流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)滑膜成纖維樣細(xì)胞純度，并與鈦金屬顆粒共培養(yǎng)模擬體內(nèi)松動(dòng)界膜中細(xì)胞的生存環(huán)境，建立體外細(xì)胞模型，MTT法檢測(cè)細(xì)胞活性和增殖情況，驗(yàn)證模型可行性。QRT-PCR、Western blotting檢測(cè)不同濃度梯度和刺激時(shí)間的鈦

4、金屬顆粒刺激下，F(xiàn)LSs細(xì)胞RANKL、OPG、HIF-1α的mRNA和蛋白表達(dá)情況。
　　結(jié)果:
　　鈦顆?？梢源龠M(jìn)滑膜成纖維樣細(xì)胞增殖。隨鈦顆粒濃度增加，RANKL/OPG和HIF-1α的蛋白和mRNA水平均呈遞增趨勢(shì);隨鈦顆粒刺激時(shí)間增加，RANKL/OPG的蛋白和mRNA水平先增高后降低，HIF-1α則呈遞增趨勢(shì)。
　　結(jié)論:
　　鈦金屬顆粒刺激可以誘導(dǎo)滑膜成纖維樣細(xì)胞增殖;鈦金屬顆粒可以誘導(dǎo)滑膜成纖維細(xì)