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文檔簡介
1、背景:
磨損顆粒誘導的骨溶解是關節(jié)假體無菌性松動的主要原因。參與這一復雜生物學效應的細胞包括巨噬細胞、破骨細胞、骨(成骨)細胞、滑膜成纖維樣細胞(fibro-like synoviocytes FLSs)、淋巴細胞等。顆粒引起的慢性炎癥反應,導致假體周圍組織內(nèi)巨噬細胞聚集,趨化因子,細胞因子等釋放最終激活RANKL-OPG信號通路并誘導破骨細胞分化成熟造成骨的吸收是假體松動的發(fā)生的研究共識。假體周圍組織長期處于相對缺氧狀態(tài),H
2、IF-1α的表達對細胞缺氧耐受的建立至關重要。有研究表明HIF-1α的表達骨發(fā)育及骨折愈合中血管長入也起著重要的促進作用。前期通過免疫組織化學染色發(fā)現(xiàn)界膜中大量的RANKL、OPG以及HIF-1α的表達,推測界膜中HIF-1α與RANKL-OPG信號通路存在相互作用,并與假體無菌性松動密切相關。
目的:
建立體外關節(jié)假體無菌性松動界膜的滑膜成纖維樣細胞模型。研究鈦金屬顆粒誘導松動界膜中滑膜成纖維樣細胞HIF-1α表達
3、和RANKL/OPG信號通路活化情況及兩者的相關性,探究HIF-1α與RANKL-OPG信號通路在假體無菌性松動中的作用。
方法:
收集健康成人的滑膜組織,分離提取人滑膜成纖維樣細胞,流式細胞技術檢測滑膜成纖維樣細胞純度,并與鈦金屬顆粒共培養(yǎng)模擬體內(nèi)松動界膜中細胞的生存環(huán)境,建立體外細胞模型,MTT法檢測細胞活性和增殖情況,驗證模型可行性。QRT-PCR、Western blotting檢測不同濃度梯度和刺激時間的鈦
4、金屬顆粒刺激下,F(xiàn)LSs細胞RANKL、OPG、HIF-1α的mRNA和蛋白表達情況。
結果:
鈦顆??梢源龠M滑膜成纖維樣細胞增殖。隨鈦顆粒濃度增加,RANKL/OPG和HIF-1α的蛋白和mRNA水平均呈遞增趨勢;隨鈦顆粒刺激時間增加,RANKL/OPG的蛋白和mRNA水平先增高后降低,HIF-1α則呈遞增趨勢。
結論:
鈦金屬顆粒刺激可以誘導滑膜成纖維樣細胞增殖;鈦金屬顆??梢哉T導滑膜成纖維細
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