MDM2基因多態(tài)性與結(jié)直腸癌易感性的關(guān)聯(lián)研究.pdf

1、目的：鼠雙微基因（Mouse double mimute2,MDM2）是一種與人類惡性腫瘤發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)密切相關(guān)的癌基因。本實(shí)驗(yàn)將通過病例-對(duì)照研究方法，探討MDM2基因的rs2279744及rs117039649兩個(gè)位點(diǎn)的單核苷酸多態(tài)性與結(jié)直腸癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)之間的關(guān)系，希望能為結(jié)直腸癌的早期診斷和治療在分子生物學(xué)水平上提供一定的理論依據(jù)。
　　方法：選取在2014年2月-2016年2月間就診于河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院的結(jié)直腸癌患者共371例（

2、其中直腸癌患者209例、結(jié)腸癌患者162例）作為實(shí)驗(yàn)組和健康人群199例作為對(duì)照組，運(yùn)用病例-對(duì)照研究方法對(duì)其進(jìn)行研究。運(yùn)用蛋白酶K消化-飽和氯化鈉鹽析法對(duì)外周血白細(xì)胞中的DNA進(jìn)行提取，采用聚合酶鏈反應(yīng)-連接酶檢測(cè)反應(yīng)（Polymerase Chain Reaction-ligase detection reaction， PCR-LDR）方法對(duì) MDM2基因的rs2279744及 rs117039649兩個(gè)位點(diǎn)單核甘酸多態(tài)性的等位基

3、因及基因型頻率分布情況進(jìn)行檢測(cè)。
　　使用SPSS13.0版軟件包（SPSS Company，Chicago，Illionis,USA）對(duì)所得到的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。運(yùn)用t檢驗(yàn)分別對(duì)結(jié)腸癌組、直腸癌組與健康對(duì)照組之間的年齡情況是否存在差異進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析；并運(yùn)用χ2檢驗(yàn)分別對(duì)結(jié)腸癌組、直腸癌組與健康對(duì)照組的性別差異、等位基因分布頻率及基因型分布頻率是否存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異進(jìn)行分析。利用Hardy-Weinberg對(duì)兩個(gè)組別基因型頻率的

4、分布進(jìn)行連鎖平衡分析。應(yīng)用Logistic回歸法計(jì)算比值比（odds ratio, OR）及95％可信區(qū)間（confidence interval, CI）。
　　結(jié)果：
　　1對(duì)MDM2基因rs2279744及rs117039649兩位點(diǎn)在健康對(duì)照組人群中的基因型頻率應(yīng)用Hardy-weinberg定律方法進(jìn)行遺傳平衡檢測(cè)，其結(jié)果說明該人群符合遺傳平衡法則（P>0.05）。
　　2 MDM2基因rs2279744位點(diǎn)

5、的G和T等位基因在健康對(duì)照組和直腸癌病例組中的分布頻率分別為：59.29％、40.71%和67.70％、32.30％，兩組數(shù)據(jù)之間比較，其P值為0.01，P<0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；MDM2基因rs2279744位點(diǎn)的G和T等位基因在健康對(duì)照組和結(jié)腸癌病例組中的頻率分別為：59.29％、40.71%和67.90％、32.10％，兩組數(shù)據(jù)之間比較，其P值為0.01，P<0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。MDM2基因rs2279744位點(diǎn)的G

6、G、GT、TT基因型在健康對(duì)照組和直腸癌病例組中所占頻率分別為：35.18％、48.24％、16.58％和53.59％、28.23％、18.18％，兩組通過OR分析得出：GG基因型與 GT基因型相比，其 OR=2.603，95%CI=1.68-4.05；TT基因型與 GT基因型相比，其 OR=1.874，95%CI=1.06-3.31，提示GG基因型及TT基因型均可增加直腸癌發(fā)病的風(fēng)險(xiǎn)。MDM2基因rs2279744位點(diǎn)的GG、GT、T

7、T基因型在健康對(duì)照組和結(jié)腸癌病例組中所占頻率分別為：35.18％、48.24％、16.58％和54.32％、27.16％、18.52％，兩組通過OR分析得出：GG基因型與GT基因型相比，其 OR=2.743，95% CI=1.71-4.41；TT基因型與 GT基因型相比，其OR=1.983，95%CI=1.08-3.56，提示 GG基因型及 TT基因型均可增加結(jié)腸癌發(fā)病的風(fēng)險(xiǎn)。
　　3 MDM2基因rs117039649位點(diǎn)的G和

8、C等位基因在健康對(duì)照組和結(jié)腸癌病例組中的分布頻率分別為：98.74%、1.26%和98.77%、1.23%，兩組數(shù)據(jù)之間比較，其P值為0.97，P＞0.05，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。MDM2基因rs117039649位點(diǎn)的G和C等位基因在健康對(duì)照組和直腸癌病例組中的分布頻率分別為：98.74%、1.26%和99.28%、0.72%，兩組數(shù)據(jù)之間比較，其P值為0.43，P＞0.05，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。MDM2基因rs117039649位點(diǎn)的GG

9、和GC基因型在健康對(duì)照組和直腸癌病例組中的頻率分別為：97.98％、2.02％和98.56％、1.44％，兩組通過OR分析得出：GC基因型與GG基因型相比，其OR=0.565，95%CI=0.13-2.39，提示GC基因型可能與直腸癌的發(fā)病之間無明顯相關(guān)性。MDM2基因 rs117039649位點(diǎn)的GG和GC基因型在健康對(duì)照組和結(jié)腸癌病例組中的頻率分別為：97.98％、2.02％和97.53％、2.47％，兩組通過OR分析得出：GC基因

10、型與GG基因型相比，其OR=0.982，95%CI=0.26-3.72，提示GC基因型可能與結(jié)腸癌的發(fā)病之間無明顯相關(guān)性。
　　4運(yùn)用軟件（EH和2LD）對(duì)MDM2基因的rs2279744和rs117039649兩位點(diǎn)之間進(jìn)行聯(lián)合分析后發(fā)現(xiàn)：在直腸癌病例組中兩位點(diǎn)之間符合連鎖不平衡關(guān)系（D'=0.492），其中在對(duì)照組中rs2279744G-rs117039649G單體型所占頻率為59.04%，為最常見的單體型，其次為rs2279

11、744T-rs117039649G單體型（39.70%）、rs2279744T-rs117039649C單體型（1.01%）和rs2279744G-rs117039649C單體型（0.25%）。人群中rs2279744G-rs117039649G單體型可能增加直腸癌發(fā)病的風(fēng)險(xiǎn)（OR=1.438，95%CI=1.08-1.92）。rs2279744T-rs117039649G單體型可能降低直腸癌發(fā)病的風(fēng)險(xiǎn)（OR=0.709，95%CI=0

12、.53-0.95）。人群中rs2279744G-rs117039649C單體型和rs2279744T-rs117039649C單體型可能與直腸癌的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)之間無相關(guān)性。在結(jié)腸組中兩位點(diǎn)之間存在連鎖不平衡關(guān)系（D'=0.021）。人群中rs2279744G-rs117039649G單體型可能增加結(jié)腸癌發(fā)病的風(fēng)險(xiǎn)（ OR=1.447，95%CI=1.07-1.97）。rs2279744T-rs117039649G單體型可能降低結(jié)腸癌發(fā)病的風(fēng)

13、險(xiǎn)（OR=0.688，95%CI=0.51-0.94）。rs2279744G-rs117039649C單體型和rs2279744T-rs117039649C單體型可能與結(jié)腸癌發(fā)病的風(fēng)險(xiǎn)之間無相關(guān)性。
　　結(jié)論：
　　1 MDM2基因rs2279744位點(diǎn)的基因多態(tài)性可能與結(jié)直腸癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)存在相關(guān)性，GG基因型和TT基因型與GT基因型相比均增加了結(jié)直腸癌的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)。
　　2 MDM2基因rs117039649位點(diǎn)的基因多