XRCC6基因多態(tài)性與結(jié)直腸癌發(fā)病風險的關(guān)聯(lián)研究.pdf

1、目的:本研究通過病例-對照研究的方法，試討論XRCC6基因rs5751129和rs2267437兩個位點的單核苷酸多態(tài)性(single nucleotide ploymorphisms SNP)與結(jié)直腸癌(Colorectal Cancer CRC)發(fā)病風險的相關(guān)性，為CRC高危人群的篩檢及診治提供有利的分子生物學依據(jù)。
　　 方法:選取2012年2月-2013年2月間就診于河北醫(yī)科大學第四醫(yī)院的78例直腸癌患者，51例結(jié)腸癌患

2、者和74例健康人群做病例-對照研究。對符合實驗條件的對象采集靜脈血5ml，并記錄年齡、性別、吸煙、飲酒、家族史等信息。采用蛋白酶K消化-飽和氯化鈉鹽析法提取研究對象白細胞中的DNA，采用聚合酶鏈反應(yīng)-連接酶檢測反應(yīng)(Polymerase Chain Reaction-ligase detection reaction，PCR-LDR)方法對XRCC6基因的rs2267437C/G和rs5751129C/T兩個SNP位點等位基因及基因分型

3、進行檢測。
　　 應(yīng)用SPSS13.0軟件(SPSS Company, Chicago，Illinois，USA)對實驗數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析。采用x2檢驗及t檢驗對性別、抽煙、飲酒、腫瘤家族史及年齡加以分析，以P=0.05為檢驗水準，P＜0.05有統(tǒng)計學意義。采用x2對對照組基因型頻率進行Hardy-Weinberg平衡分析。采用x2檢驗對實驗組與對照組之間的基因型和等位基因型分布加以分析比較。單體型頻率和連鎖不平衡分析采用EH軟件

4、和2LD軟件(1.2 version，Rockefeller University, New York)。應(yīng)用非條件Logistic回歸法計算表示相對風險度的比值比(odds ratio，OR)及95％可信區(qū)間(confidence interval,CI)。
　　 結(jié)果:
　　 1、對照組中-1310 rs2267437C/G和T-991 Crs5751129C/T兩個位點的基因型頻率分布都符合Hardy-Weinbe

5、rg平衡（P＞0.05）。
　　 2、XRCC6基因rs5751129C/T多態(tài)性與CRC發(fā)病風險相關(guān)性分析:XRCC6基因rs5751129C/T位點上等位基因C和T在結(jié)腸癌組中出現(xiàn)頻率為96.1％和3.9％，直腸癌組中出現(xiàn)頻率為92.9％和7.1％，在對照組中為94.6％和5.4％，兩組分別相比，認為結(jié)腸癌和對照組，直腸癌和對照組的差異均沒有統(tǒng)計學意義（P分別為0.553和0.812）。在結(jié)腸癌組中T/T、C/T兩種基因型出

6、現(xiàn)的頻率分別92.2％和7.8％，直腸癌組中T/T、C/T兩種基因型出現(xiàn)的頻率分別85.9％和14.1％，而在正常對照組中分別為89.2％和10.8％，兩組分別與對照組相比較，差異均無統(tǒng)計學意義（P分別為0.841和0.852）。攜帶T/T基因型和C/T基因型與結(jié)腸癌和直腸癌的發(fā)生無相關(guān)性(OR=0.876，95％CI=0.239-3.214;OR=1.111，95％ CI=0.368-3.353)。
　　 3、XRCC6基因r

7、s2267437C/G多態(tài)性與CRC發(fā)病風險的相關(guān)性分析:XRCC6基因rs2267437C/G位點上等位基因C和G在結(jié)腸癌組中出現(xiàn)頻率為78.4％和21.6％，在直腸癌組中出現(xiàn)頻率為76.9％和23.1％，在正常對照組中為87.2％和12.8％，表明在直腸癌與對照組的對比中，差別有統(tǒng)計學意義（P＜0.02）;在結(jié)腸癌與對照組的對比中差異無統(tǒng)計學意義（P=0.67）。在結(jié)腸癌中C/C、C/G兩種基因型出現(xiàn)的頻率分別為56.9％和43.1

8、％，在直腸癌中分別為53.8％和46.2％，而在正常對照組中則為74.3％和25.7％，結(jié)腸癌組和直腸癌組分別與對照組對比較，差異均有統(tǒng)計學意義(P=0.041, OR=2.196,95％CI=1.026-4.700;P=0.009, OR=2.481,95％CI=1.250-4.926)。
　　 4、采用EH軟件和2LD軟件對結(jié)腸癌組和對照組中XRCC6基因rs2267437C/G和rs5751129C/T兩SNPs位點進行聯(lián)

9、合分析。顯示(Table5)XRCC6基因rs2267437C/G與rs5751129C/T兩位點間存在連鎖的不平衡現(xiàn)象(D'=0.994)。人群中rs5751129T-rs2267437C單體型(OR=1.250，95％CI=1.052～2.075), rs5751129T-rs2267437G單體型(OR=0.846,95％CI=0.506～0.914)，表明此兩種基因型與結(jié)腸癌發(fā)病風險存在關(guān)聯(lián)性。其它兩種單體型的OR值和95％CI

10、分別為0.406(95％CI=0.009～18.820)、0.716(95％CI=0.209～2.449)，表明此兩種單體型可能與結(jié)腸癌的發(fā)病風險無關(guān)。
　　 對直腸癌組和對照組中XRCC6基因rs2267437C/G和rs5751129C/T兩位點SNPs聯(lián)合分析，顯示(Table6)XRCC6基因rs2267437C/G與rs5751129C/T兩位點間存在連鎖的不平衡現(xiàn)象(D'=0.993)。四種單體型的OR值和95％CI

11、分別為0.598(95％CI=0.653～1.605)、1.331(95％CI=0.519～3.413),1.024(95％CI=0.653～1.605)、0.913(95％CI=0.579～1.439)，表明此四種單體型可能與直腸癌的發(fā)病風險無相關(guān)性。
　　 結(jié)論:
　　 1、XRCC6基因T-991C(rs5751129) SNP可能與CRC的發(fā)病風險無相關(guān)性。
　　 2、XRCC6基因-1310(rs226

12、7437) SNP與CRC的發(fā)病風險存在相關(guān)性。攜帶C/G基因型可能會增加CRC發(fā)病風險。G等位基因可能是河北及其周邊地區(qū)人群CRC發(fā)病的一個基因易感性標志。
　　 3、結(jié)腸癌組和對照組中XRCC6基因rs5751129與-rs2267437SNPs位點間存在連鎖不平衡(D'=0.994)。rs5751129T-rs2267437C單體型增加結(jié)腸癌的發(fā)病風險，而rs5751129T-rs2267437G單體型降低結(jié)腸癌發(fā)病風險。