毛竹全長(zhǎng)均一化cDNA文庫構(gòu)建與快速生長(zhǎng)相關(guān)基因的篩選.pdf

1、毛竹是我國(guó)森林資源中分布最廣、面積最大、用途最多的竹種，在竹業(yè)生產(chǎn)中占有十分重要的地位，具有極高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值、生態(tài)價(jià)值和文化價(jià)值，毛竹的生長(zhǎng)速度非?？?，在天然狀態(tài)下，從幼竹出土長(zhǎng)至20米的幼竹稈形僅需45-60天，其生長(zhǎng)高峰期時(shí)一晝夜生長(zhǎng)高度可達(dá)1米以上，這么快的生長(zhǎng)速度很難在其他非竹類植物群中見到。
　　前人利用顯微技術(shù)、高通量測(cè)序及蛋白組學(xué)研究方法已獲得部分毛竹快速生長(zhǎng)相關(guān)結(jié)構(gòu)、激素水平、特異基因信息。但毛竹遺傳轉(zhuǎn)化體系尚未系統(tǒng)

2、建立，毛竹優(yōu)勢(shì)基因功能亟待系統(tǒng)發(fā)掘與研究。
　　日本理化研究所Minami Matsui博士在2009年構(gòu)建水稻全長(zhǎng)cDNA文庫并將水稻基因大規(guī)模在擬南芥中過表達(dá)以研究水稻基因功能，并命名其為FOX（Full-length Overexpress）過表達(dá)體系。此外，我國(guó)重要林木物種如馬尾松、杉木等生長(zhǎng)緩慢、周期長(zhǎng)，如何縮短林木生產(chǎn)周期、提升生長(zhǎng)速度一直是我國(guó)林業(yè)生產(chǎn)的重要目標(biāo)。因此，篩選與開發(fā)通用快速生長(zhǎng)毛竹基因具有重要意義。

3、r>　　因此，本項(xiàng)目借助最新的In-fusion技術(shù)及均一化關(guān)鍵酶DSN（Duplex specific nuclease），自主研發(fā)并初步建立了毛竹全長(zhǎng)均一化cDNA文庫，通過水平基因轉(zhuǎn)移技術(shù)將其在雙子葉植物擬南芥中大規(guī)模隨機(jī)過表達(dá)，以期篩選單雙子葉植物通用的快速生長(zhǎng)基因。
　　利用毛竹基因過表達(dá)的擬南芥株系篩選出葉形特異（40株）、莖稈特異（10株）、矮?。?3株）、早花（12株）、晚花（25株）與快速生長(zhǎng)（10株）等多類表型