毛竹全長均一化cDNA文庫構建與快速生長相關基因的篩選.pdf

1、毛竹是我國森林資源中分布最廣、面積最大、用途最多的竹種，在竹業(yè)生產(chǎn)中占有十分重要的地位，具有極高的經(jīng)濟價值、生態(tài)價值和文化價值，毛竹的生長速度非?？欤谔烊粻顟B(tài)下，從幼竹出土長至20米的幼竹稈形僅需45-60天，其生長高峰期時一晝夜生長高度可達1米以上，這么快的生長速度很難在其他非竹類植物群中見到。
　　前人利用顯微技術、高通量測序及蛋白組學研究方法已獲得部分毛竹快速生長相關結構、激素水平、特異基因信息。但毛竹遺傳轉化體系尚未系統(tǒng)

2、建立，毛竹優(yōu)勢基因功能亟待系統(tǒng)發(fā)掘與研究。
　　日本理化研究所Minami Matsui博士在2009年構建水稻全長cDNA文庫并將水稻基因大規(guī)模在擬南芥中過表達以研究水稻基因功能，并命名其為FOX（Full-length Overexpress）過表達體系。此外，我國重要林木物種如馬尾松、杉木等生長緩慢、周期長，如何縮短林木生產(chǎn)周期、提升生長速度一直是我國林業(yè)生產(chǎn)的重要目標。因此，篩選與開發(fā)通用快速生長毛竹基因具有重要意義。

3、r>　　因此，本項目借助最新的In-fusion技術及均一化關鍵酶DSN（Duplex specific nuclease），自主研發(fā)并初步建立了毛竹全長均一化cDNA文庫，通過水平基因轉移技術將其在雙子葉植物擬南芥中大規(guī)模隨機過表達，以期篩選單雙子葉植物通用的快速生長基因。
　　利用毛竹基因過表達的擬南芥株系篩選出葉形特異（40株）、莖稈特異（10株）、矮?。?3株）、早花（12株）、晚花（25株）與快速生長（10株）等多類表型