甘藍型油菜cDNA差減文庫和均一化文庫的構(gòu)建.pdf

1、油菜是我國主要的油料作物，大約有50％的食用植物油來源于油菜。長期以來，選育高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)油菜一直是育種家所面臨的主要任務(wù)。實踐證明，雜種優(yōu)勢的利用是提高油菜產(chǎn)量的主要途徑，而雄性不育是雜種優(yōu)勢利用的重要手段。隱性細(xì)胞核雄性不育因其具有不育性徹底、穩(wěn)定、恢復(fù)源廣等優(yōu)點，在國內(nèi)已經(jīng)成為雜種優(yōu)勢利用的一個重要途徑，但由于得不到100％的不育系，在雜交制種時需人工拔除不育系株行中50％的可育株，限制了其廣泛應(yīng)用。 本研究以甘藍型油菜雙隱性細(xì)

2、胞核雄性不育系S45AB為材料，利用抑制性差減雜交技術(shù)（SSH）構(gòu)建了S45AB小花蕾期的正反向差減文庫。對差減文庫進行質(zhì)量檢測表明其質(zhì)量完好。藉此，可以通過反向Northern雜交技術(shù)篩選到育性相關(guān)基因，分析S45AB雄性不育機理，為更好地利用S45AB打下堅實的基礎(chǔ)。 另外，我們利用雙鏈特異性核酸酶（duplex-specific nuclease，DSN）均一化方法構(gòu)建了甘藍型油菜華雜4號小花蕾的均一化文庫。對均一化文庫進