腸癌細(xì)胞外泌體miR--17促進(jìn)腸癌肝轉(zhuǎn)移的作用及機(jī)制研究.pdf

1、組織微環(huán)境在腫瘤的起始和轉(zhuǎn)移過(guò)程中有重要作用。不僅腫瘤原發(fā)部位的原正常組織微環(huán)境在中后期通過(guò)轉(zhuǎn)化為腫瘤微環(huán)境(tumor microenvironment，TME)促進(jìn)原發(fā)腫瘤的增殖和侵襲，而且轉(zhuǎn)移靶器官的組織微環(huán)境在轉(zhuǎn)移灶形成前即可能轉(zhuǎn)變?yōu)檗D(zhuǎn)移前微環(huán)境(pre-metastatic niche)，形成一個(gè)適宜循環(huán)腫瘤細(xì)胞(Circulating Tumor Cells，CTCs)生長(zhǎng)的環(huán)境（也可稱為癌前利基），通過(guò)分泌細(xì)胞因子等誘使C

2、TCs其在該位點(diǎn)定植、生長(zhǎng)并形成繼發(fā)病灶，從而促進(jìn)惡性腫瘤的轉(zhuǎn)移。外泌體(exosome)是最近研究發(fā)現(xiàn)的調(diào)控轉(zhuǎn)移前微環(huán)境形成的重要因子。在胰腺癌肝轉(zhuǎn)移、黑色素瘤肺轉(zhuǎn)移等小鼠模型中，都證明了腫瘤細(xì)胞來(lái)源外泌體(tumor-cell-derived-exosomes，TEXs)通過(guò)促進(jìn)轉(zhuǎn)移前微環(huán)境的形成加速腫瘤轉(zhuǎn)移，但死亡率較高的腸癌肝轉(zhuǎn)移中目前尚未有相關(guān)研究。為了研究腸癌細(xì)胞外泌體及其內(nèi)容物microRNA對(duì)腸癌肝轉(zhuǎn)移的影響，我們建立了

3、不同轉(zhuǎn)移能力的細(xì)胞株脾臟接種的腸癌肝轉(zhuǎn)移小鼠移植瘤模型，通過(guò)脾臟接種腫瘤細(xì)胞前持續(xù)尾靜脈注射外泌體，觀察腸癌細(xì)胞外泌體對(duì)轉(zhuǎn)移靶器官組織微環(huán)境的影響和作用。我們發(fā)現(xiàn)腸癌細(xì)胞外泌體能夠被肝組織巨噬細(xì)胞攝取并吸收，高轉(zhuǎn)移力的腸癌細(xì)胞株外泌體(SW620-exo)能夠誘導(dǎo)肝組織正常微環(huán)境轉(zhuǎn)變?yōu)檠仔晕h(huán)境，且促進(jìn)腸癌肝轉(zhuǎn)移，而相同劑量的低轉(zhuǎn)移細(xì)胞株外泌體則無(wú)此作用。然后我們通過(guò)miRNA高通量深度測(cè)序分析不同轉(zhuǎn)移力腸癌細(xì)胞外泌體中microRNA

4、表達(dá)譜差異，篩選出與轉(zhuǎn)移相關(guān)的候選microRNA，其中miR-17在高轉(zhuǎn)移細(xì)胞株中表達(dá)明顯上調(diào)。再利用qPCR方法驗(yàn)證高低轉(zhuǎn)移細(xì)胞株、以及臨床樣本外周血血清外泌體中miR-17的表達(dá)水平，發(fā)現(xiàn)其表達(dá)水平與腸癌轉(zhuǎn)移顯著相關(guān)。體外實(shí)驗(yàn)表明，miR-17可能通過(guò)結(jié)合TLR8激活NF-κB等下游通路，活化巨噬細(xì)胞，促進(jìn)IL1-β、IL-6、TNF-α等前炎性因子的表達(dá)。本研究揭示了腸癌細(xì)胞外泌體可能通過(guò)該機(jī)制促進(jìn)肝組織轉(zhuǎn)移前微環(huán)境的形成，從而