IL-5通過(guò)JAK2-STAT3途徑上調(diào)THP-1巨噬細(xì)胞ABCA1的表達(dá).pdf

1、目的：白細(xì)胞介素-5（IL-5）被證實(shí)能對(duì)抗動(dòng)脈粥樣硬化（As）發(fā)生發(fā)展，其具體作用機(jī)制尚未被完全認(rèn)識(shí)。本研究旨在探討 IL-5能否通過(guò)JAK2/STAT3途徑上調(diào)THP-1巨噬細(xì)胞ATP結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體A1（ABCA1）表達(dá)。
　　方法：將 THP-1細(xì)胞誘導(dǎo)轉(zhuǎn)變成泡沫細(xì)胞，經(jīng)不同濃度的IL-5處理相同時(shí)間或同一濃度IL-5(0.15 ng/mL)處理不同時(shí)間(0,6,12,24,48 h)，用油紅O染色觀察細(xì)胞內(nèi)脂滴多少，高效液相

2、色譜法測(cè)定細(xì)胞內(nèi)膽固醇含量，液體閃爍計(jì)數(shù)法檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)膽固醇流出率；Western blot測(cè)定細(xì)胞內(nèi)ABCA1蛋白含量，實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)ABCA1 mRNA水平。IL-5或抗IL-5抗體處理細(xì)胞24小時(shí)，Western blot檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)磷酸化的JAK2、STAT3及總蛋白水平。JAK2和STAT3抑制劑或轉(zhuǎn)染JAK2和STAT3 siRNA對(duì)IL-5作用下的細(xì)胞處理24小時(shí)，檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)ABCA1、JAK2和磷酸化STAT3蛋白水平。

3、
　　結(jié)果：IL-5能夠上調(diào)THP-1巨噬細(xì)胞ABCA1蛋白及mRNA表達(dá)水平，且呈現(xiàn)出一定時(shí)間和劑量依賴性。進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)證實(shí) IL-5通過(guò)激活JAK2和STAT3，增加細(xì)胞內(nèi)ABCA1基因轉(zhuǎn)錄以及ABCA1蛋白表達(dá)，促進(jìn)細(xì)胞內(nèi)膽固醇流出，減少膽固醇蓄積；JAK2和STAT3抑制劑預(yù)處理或相應(yīng)特異性siRNA轉(zhuǎn)染荷脂后的THP-1巨噬細(xì)胞， 能顯著削弱IL-5促進(jìn)ABCA1蛋白表達(dá)的作用。
　　結(jié)論：IL-5可通過(guò)激