外周炎癥引起中樞神經(jīng)系統(tǒng)炎癥反應(yīng)及與多巴胺D2受體的關(guān)系.pdf

1、神經(jīng)系統(tǒng)變性疾病是一組在中老年人群中常見(jiàn)的，以病程長(zhǎng)、臨床表現(xiàn)多樣化并且具有進(jìn)展性為主要特點(diǎn)的疾病。經(jīng)由大量的動(dòng)物模型和此類(lèi)疾病死亡患者腦部解剖等基礎(chǔ)研究可發(fā)現(xiàn)所有神經(jīng)系統(tǒng)變性疾病都存在著共同的病理特點(diǎn)。即為，此類(lèi)型疾病中下屬每種疾病都在大腦灰質(zhì)的特定部位存在著神經(jīng)元細(xì)胞的壞死和大量的膠質(zhì)細(xì)胞病理性增生、肥大。前者已被證實(shí)與炎癥反應(yīng)有關(guān)而后者本身就是炎癥反應(yīng)的基本表現(xiàn)。由此可看出，炎癥在神經(jīng)系統(tǒng)變性疾病發(fā)病機(jī)制中占有不可或缺的地位。膠質(zhì)

2、細(xì)胞是中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的免疫細(xì)胞，然而持續(xù)的炎癥反應(yīng)導(dǎo)致小膠質(zhì)細(xì)胞過(guò)度激活，進(jìn)而使腫瘤壞死因子α(Tumour necrosises factoralpha，TNF-α)、白介素-1β(Interleukin-1β，IL-1β)等炎性因子的分泌異常，從而再次加重神經(jīng)炎癥，最終結(jié)局就是引發(fā)神經(jīng)系統(tǒng)變性疾病。近年來(lái)研究表明，多巴胺受體D2(dopamine type-2(D2) receptor，D2R)與中樞神經(jīng)系統(tǒng)炎癥因子異常分泌有著一定

3、的關(guān)系。D2R在腦內(nèi)主要表達(dá)在包括神經(jīng)元在內(nèi)的多種細(xì)胞表面，且大部分聚集在黑質(zhì)部位。本實(shí)驗(yàn)旨在探討D2R在腦內(nèi)處于炎癥環(huán)境時(shí)是否起到了抗炎的作用。
　　目的：
　　本實(shí)驗(yàn)主要為了研究腹腔一次性大劑量注射細(xì)菌脂多糖(lipopolysaccha-ride，LPS)對(duì)腦內(nèi)炎癥因子的影響和對(duì)小膠質(zhì)細(xì)胞及星型膠質(zhì)細(xì)胞表面D2R表達(dá)的影響及腦內(nèi)炎癥與D2R間的關(guān)系。
　　方法：
　　收集大鼠腹腔注射1mg/mlLPS后各時(shí)

4、點(diǎn)(30min、1d、3d、21d)黑質(zhì)部分，驗(yàn)證各組中TNF-α、IL-1β的表達(dá)，整體實(shí)驗(yàn)分為正常組，藥物組（腹腔注射LPS），激動(dòng)劑(Quinpirole)+藥物組共3組進(jìn)行比較。1、免疫熒光檢測(cè)黑質(zhì)部位小膠質(zhì)細(xì)胞、星形膠質(zhì)細(xì)胞表面有D2R表達(dá)。2、ELISA檢測(cè)TNF-α及IL-1β濃度。3、Western blot法檢測(cè)黑質(zhì)部位D2R表達(dá)水平。4、使用D2R激動(dòng)劑后再次檢測(cè)兩種細(xì)胞因子表達(dá)量變化。
　　結(jié)果：
　　

5、1、在小膠質(zhì)細(xì)胞及星型膠質(zhì)細(xì)胞表面（包括靜息狀態(tài)和激活狀態(tài)）均有D2R表達(dá);2、腹腔一次性大劑量注射LPS后腦內(nèi)黑質(zhì)部位D2R含量隨時(shí)間的變化為:D2R含量在腹腔注射LPS后30分鐘時(shí)較正常對(duì)照組數(shù)值略有下降，之后D2R含量在1天時(shí)開(kāi)始上升，并高于正常對(duì)照組，3天時(shí)D2R達(dá)到峰值，21天D2R含量下降數(shù)值低于正常對(duì)照組，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);3、腹腔一次性大劑量注射LPS后，從炎癥因子與D2R含量隨時(shí)間變化上可以看出，炎癥因子

6、表達(dá)在LPS注射后1天時(shí)已達(dá)高峰，而D2R含量的增長(zhǎng)則滯后于炎癥因子，在3天時(shí)達(dá)到峰值，此時(shí)炎癥因子含量下降，21天時(shí)炎癥因子表達(dá)仍高于正常對(duì)照組數(shù)值，而D2R含量卻低于正常對(duì)照組(P＜0.05);4、黑質(zhì)定位注射D2R激動(dòng)劑Quinpirole組與未注射Quinpirole組在腹腔一次性大劑量注射LPS后比較炎癥因子的表達(dá)量，前者在1天和3天時(shí)數(shù)值明顯低于后者(P＜0.05)。
　　結(jié)論：
　　1、外周炎癥可造成腦內(nèi)黑質(zhì)部