鮭魚降鈣素基因在大腸桿菌中的表達(dá)純化及藥理活性研究.pdf

1、分類號：R 2 8 5 ．5密級：湖南中醫(yī)學(xué)院編號：碩士學(xué)位論文論文題目：鮭魚睦鈣素基因查大腸桿菌中的表達(dá)純J 匕殳藥理活} 生研究學(xué)科專業(yè)： 中藥學(xué)研究生姓名： 芒空盤導(dǎo)師姓名及職稱： 田育望教授陳室盤副盟究亟E x p r e s s i n g o fS a l m o n C a l c i t o n i ni nE c o l ia n d I t sP h a r m a c o l o g i c a l A c t i

2、 v i t yS t u d yP o s t g r a d u a t e ：S h o u - S h e n g Y a hD i r e c t o r ：Y u —W a n g T i a nr H u n a n C o l l e g eo f T C M ，C h a n g s h a , 4 1 0 0 0 7 )A b s t r a c tC a l c i t o n i n i s o n e o ft

3、 h e m o s ti m p o r t a n tp e p t i d e si n m e t a b o l i s mo fc a l c i u ma n dp h o s p h o r o u sa n d i nd e v e l o p m e n ta n d d i f f e r e n t i a t i o no f b o n e ．W ea i m e d t o e x p r e s s r

4、e c o m b i n a n t s a l m o n c a l c i t o n i n “s C T ) i nE S c h 盯i c h i ac o l i ．，h o w e v e rs C Ta n dm a n yp o l y p e p t i d e sn e e dc a r b o x ya m i d a t i o nf o rf u l la c t i v 時(shí)o r p r o l o n

5、 g e db i o a v a i l a b i l i t y , t h i sm o d i f i c a t i o ni sn o tp o s s i b l ei np r o k a r y o t e s ．A m e t h o do f u s i n gs e l f - c l e a v i n gI n t e i ne x p r e s s i o ns y s t e mw a su s e

6、di nt h i ss t u d y ，t h es y s t e m i sa b l et om a k i n g a m i d a t e ds C T a n ds o m e o t h e rp e p t i d e sb y u s i n gs p e c i a lb u f f e r sw i t ha m m o n i ad u r i n gt h es e l f - c l e a v i n

7、 go f t h eC - t e r m i n a lI n t e i n ．I nt h i ss m d g w e c l o n e ds C T g e n ei n t op T W I N 1v e c t o r a n d u s e d E ．c o l i s t r a i n E R 2 5 6 6 a s t h e h o s t 。E x p r e s s i o ne x p e r i m

8、e n t sw e r e c a r r i e do u tb o t hi ns h a k ef l a s k s a n da5 L b i o r e a c t o r ．P u r i f l e dr s C Tw a s i d e n t i f i e d w i t hR T - H P L C a n di s o e l e c t r i c f o c u s i n g ．B i o l o g

9、i c a la s s a y s o f r s C T w e r eb a s e do n o s t e o c l a s t i cc e l l sr e s p o n s i v e n e s sa n db l o o dc a l c i u m d e t e r m i n a t i o ni nr a t s ：T h e r e s u l t ss h o wt h a tm o s t o f

10、t h er s C T i s i nf o r mo f a m i d a t i o na f t e rs e l f - c l e a v i n g b y I n t e i n sa n dh a s g o o d e f f e c to f h y p o c a l c e m i c b i o a c t i v i t y ．K e y w o r d s ： S a l m o n c a l c i