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文檔簡介
1、目的：IL-1β是一種重要的炎性細胞因子，樹突狀細胞（DC）是其重要來源。酸敏感離子通道（ASICs）是DC感知酸化刺激的受體，細胞外微環(huán)境酸化是一種引起細胞應(yīng)激的常見危險信號。本實驗主要研究細胞外酸化對BMDCs分泌IL-1β的影響以及ASICs介導(dǎo)其分泌的分子機制。
方法：誘導(dǎo)培養(yǎng)骨髓來源的樹突狀細胞BMDCs，成熟后用LPS（100ng/ml）預(yù)處理細胞12h，進行分組刺激。胞外酸化以pH6.5的培養(yǎng)基模擬，刺激4h后收
2、上清，ELISA檢測IL-1β的分泌；刺激后收細胞通過流式細胞術(shù)和WB檢測胞內(nèi)caspase-1的活化情況，以及阻斷其活化后檢測IL-1β的分泌；運用干擾RNA（siRNA）降低ASIC2的表達后，檢測酸刺激對DC分泌IL-1β的影響。
結(jié)果：1）胞外酸刺激可以誘導(dǎo)BMDCs分泌有活性的IL-1β。
2）酸刺激組與未刺激組相比，活化的caspase-1明顯升高。
3）siRNA干擾ASIC2后，酸刺激分泌I
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