咪唑克生對實驗性變態(tài)反應性腦脊髓炎的干預作用及相關(guān)的細胞和分子機制.pdf

1、溫州醫(yī)學院碩士學位論文咪唑克生對實驗性變態(tài)反應性腦脊髓炎的干預作用及相關(guān)的細胞和分子機制姓名：王新施申請學位級別：碩士專業(yè)：神經(jīng)病學指導教師：鄭榮遠20080501溫州醫(yī)學院碩士學位論文( i n t e r l e u k i n 一1 2 s u b u n i t p 4 0 ，I L 一1 2 p 4 0 ) 、白介素一1 0 ( i n t e r l e u k i n —1 0 ，I L —i 0 )和轉(zhuǎn)化生長因子B1 (

2、 t r a n s f o r m i n gg r o w t hf a c t o r B1 ，T G F 一1 31 ) 以及膠質(zhì)纖維酸性蛋白( g l i a l f i b r i ll a r y a c i d i cp r o t e i n ，G F A P ) m R N A 的表達。結(jié)果：( 1 ) 行為學觀察大鼠于免疫后第1 1 天開始陸續(xù)發(fā)病，除I D A l ．5 m g ／k g 組潛伏期( 1 3 ．5

3、 0 ±0 ．5 0 天) 較E A E 組( 1 1 ．3 7 ±0 ．2 6 天) 明顯延長( P < O ．0 5 ) 外，其余各組潛伏期無明顯差異。E A E 組發(fā)病率為8 ／l O ，I D A O ．5 m g ／k g 組發(fā)病率亦為8 ／1 0 ，與E A E組相同，而I D A l ．5 m g ／k g 組和I D A 4 ．5 m g ／k g 組發(fā)病率分別為2 ／1 0 和3 ／1 0 ，

4、均比E A E 組明顯下降( p < O ．0 5 ) 。從病情嚴重度來看，I D A O ．5 m g ／k g 組的最大臨床癥狀評分( 3 ．2 5±0 ．3 1 ) 與E A E 組( 4 ．0 0 + 0 ．2 7 ) 無明顯差異，而I D A l ．5 m g ／k g 組和I D A 4 ．5 m g ／k g ( 分別為2 ．o o ±0 ．0 0 和2 ．0 0 ±O ．5 8 ) 較

5、E A E 組明顯減輕( P < O ．0 1 ) 。( 2 ) 病理組織學變化：H E 染色見發(fā)病大鼠的腦、脊髓實質(zhì)內(nèi)有大量炎性細胞浸潤，以淋巴細胞為主，分布以腦干和腰髓居多，大多在灰白質(zhì)交界區(qū)，有些炎癥細胞圍繞在小血管周圍，形成典型的“血管袖套樣“ 改變；并可見神經(jīng)細胞變性、壞死，膠質(zhì)細胞結(jié)節(jié)等病理變化。K l u v e r＆B a r r e r a 髓鞘染色見發(fā)病大鼠C N S 內(nèi)有大小不等的片狀髓鞘脫失。具有以上病理改

6、變的大鼠視為有E A E 病理損害，E A E 組病理損害率為8 ／l O ，I D A O ．5 m g ／k g 組病理損害率為8 ／1 0 ，I D A l ．5 m g ／k g 組5 ／1 0 ，I D A 4 ．5 m g ／k g 組6 ／1 0 ，雖然各組病理損害率無統(tǒng)計學差異。但I D A 各組腦和脊髓的病理改變明顯減輕，尤以I D A l ．5 m g ／k g 和4 ．5 m g ／k g 組減輕明顯，病理組織學評

7、分也較E A E 組明顯下降( p < O ．0 5 ) 。( 3 ) 星形膠質(zhì)細胞G F A P 的免疫組化和R T - P C R 結(jié)果：空白對照組C N S 僅有少量細小突起著色的星形膠質(zhì)細胞；而E A E 組C N S 的G F A P 陽性細胞數(shù)目比空白對照組明顯增加( P < O ．0 1 ) ，染色加深，突起變粗變長。與E A E組比，I D A O ．5 m g ／k g 組G F A P 陽性細胞染色數(shù)目和

8、染色強度均無明顯變化，I D A l ．5 m g ／k g組和I D A 4 ．5 m g ／k g 組陽性細胞染色數(shù)目有升高趨勢染色加深( 尤其是I D A 4 ．5 m g ／k g 組) ，但沒有統(tǒng)計學意義。R T —P C R 結(jié)果顯示G F A P m R N A 在I D A l ．5 m g ／k g 組和I D A 4 ．5 m g ／k g 組有升高趨勢，但沒有統(tǒng)計學意義。( 4 ) 小膠質(zhì)細胞免疫組化結(jié)果：空白對照

9、組大鼠腦內(nèi)只有少量淡染的C D l l b 陽性細胞，為靜止的分枝狀，突起細長。E A E 發(fā)病大鼠的中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)，尤其是大腦和腦干內(nèi)，小膠質(zhì)細胞活化增生，表現(xiàn)為C D I i b 染色明顯加深，突起回縮變濃，胞體變大，C D l l b 濃染細胞數(shù)量增加( p < O ．0 5 ) 。I D A O ．5 m g ／k g 組小膠質(zhì)細胞較E A E 組無明顯變化，而I D A l ．5 m g ／k g 組和4 ．5 m g