

版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請(qǐng)進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)
文檔簡介
1、目的:
1.觀察經(jīng)尾靜脈移植骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)后膿毒癥小鼠的生存情況。
2.觀察BMSCs移植后血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)在膿毒癥小鼠體內(nèi)的基因和蛋白水平的表達(dá)情況和分泌水平。
3.初步探討B(tài)MSCs在膿毒癥早期的治療作用與凝血的相關(guān)性。
方法:
1.體外采用全骨髓法分離、純化、擴(kuò)增、培養(yǎng)BMSCs,10%FBS培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞,顯微鏡下觀察細(xì)胞生長狀況。
2.將第五代BM
2、SCs分為對(duì)照組和誘導(dǎo)組,對(duì)照組細(xì)胞按10%FBS完全培養(yǎng)基培養(yǎng),誘導(dǎo)組細(xì)胞用配制好的細(xì)胞成脂誘導(dǎo)培養(yǎng)液培養(yǎng),兩組細(xì)胞在相同條件下培養(yǎng)2周后,用油紅染色,顯微鏡下觀察細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)是否有脂滴形成。
3.117只雄性ICR小鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組(Sham組)、膿毒癥組(CLP組)和BMSCs移植組(CLP+BMSCs組),通過盲腸結(jié)扎穿孔手術(shù)制作小鼠膿毒癥模型,制模后6h,CLP+BMSCs組每只小鼠經(jīng)尾靜脈注射BMSCs懸液(含BM
3、SCs1*106/0.3ml)和CLP組每只小鼠經(jīng)尾靜脈注射生理鹽水0.3ml;每6小時(shí)觀察各組小鼠生存情況,作生存曲線圖。
4.膿毒癥小鼠干細(xì)胞移植后6、12、24小時(shí),小鼠麻醉后,通過心臟取血留取血液標(biāo)本經(jīng)酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)測(cè)定血漿分泌型血栓調(diào)節(jié)蛋白(sTM)濃度,并留取肺臟標(biāo)本作肺組織病理形態(tài)學(xué)觀察,提取肺組織RNA和蛋白質(zhì)通過分別實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)和免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測(cè)TM mRNA和TM蛋白的表達(dá)情況
4、。
結(jié)果:
1.顯微鏡下可見對(duì)照組小鼠BMSCs胞質(zhì)內(nèi)無明顯變化且未被油紅染色,誘導(dǎo)組小鼠BMSCs胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)大量脂滴并被油紅染色成橙紅色,說明小鼠BMSCs經(jīng)誘導(dǎo)培養(yǎng)后具有向脂肪細(xì)胞分化的能力。
2.CLP組和CLP+BMSCs組小鼠的4天生存率分別為30%和50%,BMSCs移植后膿毒癥小鼠的生存情況明顯得到改善,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。
3.Sham組小鼠肺組織結(jié)構(gòu)完整,肺泡腔清晰
5、,肺泡隔及支氣管未見明顯炎細(xì)胞及滲出物,可見少許紅細(xì)胞。與Sha組比較,CLP組小鼠肺組織嚴(yán)重水腫、出血,肺泡壁完整性被破壞,大量炎癥細(xì)胞浸潤;與CLP組比較,CLP+BMSCs組小鼠肺組織損傷明顯減輕,出血、細(xì)胞浸潤等情況明顯改善,并且隨時(shí)間延長肺組織重塑,組織結(jié)構(gòu)越來越清晰。
4.與Sham組相比,CLP組血漿中分泌的sTM量在6、12、24小時(shí)都明顯增多,在第12小時(shí)出現(xiàn)sTM的分泌峰值;而CLP+BMSCs組相較于CL
6、P組sTM分泌水平在在12、24h時(shí)間點(diǎn)均有顯著下降趨勢(shì),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
5.各組小鼠肺組織中TM mRNA表達(dá)和TM蛋白免疫組織化學(xué)平均陽性積分光密度值都有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05),CLP組水平明顯下降,CLP+BMSCs組顯著升高。TM mRNA在Sham組、CLP組和CLP+BMSCs組小鼠的肺組織中均有表達(dá)。CLP組相較于Sham組TM mRNA表達(dá)水平在干細(xì)胞移植后6、12、24小時(shí)均明顯
7、下降,而CLP+BMSCs組較CLP組顯著升高。CLP組小鼠肺組織TM平均陽性積分光密度值明顯低于Sham組,CLP+BMSCs組TM平均陽性積分光密度值和CLP組比較后可見明顯升高趨勢(shì),但未表現(xiàn)出隨時(shí)間點(diǎn)的變化而明顯變化。
結(jié)論:
骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植在改善膿毒癥小鼠的生存率和肺臟炎癥反應(yīng)的基礎(chǔ)上明顯降低膿毒癥小鼠內(nèi)皮細(xì)胞表面血栓調(diào)節(jié)蛋白的分泌,并且分別在基因和蛋白水平上調(diào)血栓調(diào)節(jié)蛋白的表達(dá),有可能從凝血方面影響了
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對(duì)用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對(duì)用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請(qǐng)與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)膿毒癥小鼠凝血障礙影響的研究.pdf
- 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞
- 間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)膿毒癥大鼠心肌保護(hù)作用初步研究.pdf
- 間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)膿毒癥及其腎損傷的保護(hù)作用研究.pdf
- 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)自然衰老小鼠T細(xì)胞的調(diào)節(jié)作用研究.pdf
- 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)巨噬細(xì)胞極化的影響.pdf
- 淫羊藿對(duì)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的影響.pdf
- miRNAs對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分化的影響.pdf
- 小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞原代培養(yǎng)概要
- 黃精多糖對(duì)小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化影響的研究.pdf
- 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植對(duì)血漿蛋白質(zhì)譜的影響.pdf
- 小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)肝硬化模型作用的研究.pdf
- 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞免疫調(diào)節(jié)機(jī)制的研究.pdf
- microRNA155對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞免疫調(diào)節(jié)功能影響的研究.pdf
- 骨橋蛋白對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞增殖及遷移功能的影響研究.pdf
- 抗菌型人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞的功能鑒定及其對(duì)膿毒癥小鼠的治療作用.pdf
- 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的相關(guān)研究.pdf
- 芍藥苷對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞增殖的影響.pdf
- 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)大鼠重建陰道的影響.pdf
- 骨髓微環(huán)境對(duì)間充質(zhì)干細(xì)胞特性的影響.pdf
評(píng)論
0/150
提交評(píng)論