奈必洛爾對肺高血流致大鼠肺動脈重構(gòu)的影響.pdf

1、目的:觀察奈必洛爾對動-靜脈分流術(shù)誘導(dǎo)的大鼠肺血管重構(gòu)的影響。
　　 方法:取40只健康雄性SD大鼠，體重200±20g，隨機分為假手術(shù)組(sham)、手術(shù)模型組(shunt)、奈必洛爾治療組(neb+shunt)和卡托普利治療組(capt+shunt)。shunt組、neb+shunt組及capt+shunt組均采用腹主動脈-下腔靜脈分流術(shù)，制備大鼠肺動脈高壓模型。sham組大鼠不作分流手術(shù)，其余操作同手術(shù)組。自術(shù)后第5天起，

2、neb+shunt組大鼠灌胃給奈必洛爾藥液（1mg· kg-1·kd-1），capt+shunt組大鼠灌胃給卡托普利藥液（5mg· kg-1·d-1），其余兩組大鼠灌胃給等容積的水。給藥8周后，觀察下述指標(biāo):(1)右心導(dǎo)管法測定各組大鼠右心室壓(RVP)與肺動脈壓(PAP)，計算右心室濕重/體重的比值(RV/BW)和右心室濕重/左心室+室間隔的比值（RV/LV+SP），觀察藥物干預(yù)對右心室肥厚的影響。(2)MCOD數(shù)碼醫(yī)學(xué)圖像分析系統(tǒng)計

3、算肺間小動脈相對中層面積（RMA）、相對中層厚度（RMT）、相對血管腔面積(RCA)、相對血管腔直徑(RCD)等指標(biāo)，觀察藥物干預(yù)對肺動脈重構(gòu)的影響。(3)血氣分析，測定各組大鼠血漿pH值、二氧化碳分壓(pCO2)、氧分壓(pO2)和碳酸氫根(HCO3-)，剩余堿(Beb)和血氧飽和度(O2Sat)，觀察藥物干預(yù)對大鼠血氣變化的影響。(4)離體血管張力實驗檢測離體肺動脈環(huán)對乙酰膽堿的反應(yīng)，觀察藥物干預(yù)對肺動脈高壓大鼠肺血管內(nèi)皮功能的影響

4、。(5) Western blotting測定大鼠肺組織增殖細(xì)胞核抗原(PNCA)的表達(dá)。(6)光鏡和電鏡下觀察肺動脈的形態(tài)學(xué)改變。
　　 結(jié)果:
　　 (1) shunt組大鼠SRVP、SPAP(P＜0.01)、RV/BW(P＜0.01)、RV/LV+SP(P＜0.05)明顯高于sham組;neb+shunt組和capt+shunt組SRVP、SPAP、RV/BW、RV/LV+SP指標(biāo)同shunt組相比均顯著降低(均P

5、＜0.01)，與sham組相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義。表明經(jīng)藥物干預(yù)后，肺動脈壓和右心肥厚指數(shù)降低。
　　 (2) shunt組RMA（60.9±9.4％）、RMT（70.7±11.1％）顯著高于sham組RMA（33.1±8.5％）、RMT（35.2±9.2％），提示腹主動脈-下腔靜脈分流術(shù)后，肺動脈中層平滑肌明顯增厚。藥物干預(yù)后，capt+shunt組RMA（36.5±12.5％）和RMT（39.6±16.5％），neb+shun

6、t組RMA（39.7±11.3％）和RMT（39.1±11.1％）均顯著低于shunt組(均P＜0.01)，與sham組相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義。提示藥物干預(yù)組大鼠肺動脈中層肌化現(xiàn)象減輕。
　　 (3)血氣指標(biāo)，各組間無顯著差異。Shunt組堿剩余Beb同sham組相比略降低，但差異不具有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　 (4)在sham組，乙酰膽堿(10-8～10-5 mol/L)濃度依賴性地降低去氧腎上腺素(10-6 mol/L)預(yù)收

7、縮的肺動脈環(huán)張力。在shunt組，乙酰膽堿(10-8～10-5 mol/L)降低肺動脈環(huán)張力的作用顯示降低的趨勢，當(dāng)乙酰膽堿的濃度為10-5 mol/L時，肺動脈環(huán)舒張百分率顯著低于sham組(P＜0.001)，提示shunt大鼠肺動脈內(nèi)皮功能有損傷。在卡托普利和奈必洛爾的干預(yù)下，乙酰膽堿(10-8～10-5 mol/L)對肺動脈環(huán)的舒張效應(yīng)顯著強于shunt組(P＜0.05或P＜0.01或P＜0.001)，說明奈必洛爾和卡托普利能夠減

8、輕肺高血流對肺血管內(nèi)皮的損傷。此外，卡托普利舒張血管的效果優(yōu)于奈必洛爾。
　　 (5)同shunt組大鼠(1.38±0.07)相比，capt+shunt組（1.16±0.04）和neb+shunt組(1.21±0.05)大鼠肺組織細(xì)胞增殖核抗原(PCNA)表達(dá)有減少的趨勢，但差異不具有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　 (6)光鏡下，shunt組大鼠肺間小動脈肌化程度明顯增強，肺中、小肌型動脈中層明顯增厚，neb+shunt組和capt

9、+shunt組大鼠肺血管肌化程度明顯改善;透射電鏡下觀察到，shunt組大鼠肺動脈內(nèi)彈力膜排列紊亂，有斷裂，內(nèi)彈力膜下平滑肌細(xì)胞核大，形態(tài)不規(guī)則，平滑肌細(xì)胞增生;neb+shunt組和capt+shunt組大鼠內(nèi)彈力膜基本完整，排列規(guī)則，內(nèi)彈力膜下平滑肌細(xì)胞呈梭狀，血管內(nèi)皮細(xì)胞輕度水腫。
　　 結(jié)論:奈必洛爾能減輕容量負(fù)荷型PAH大鼠發(fā)生的肺間肌性小動脈增生，逆轉(zhuǎn)右心室肌肥厚，對損傷的肺血管內(nèi)皮功能具有保護(hù)作用。奈必洛爾在改善肺