牛奶中乳鐵蛋白含量變化及其影響因素的研究.pdf

1、本試驗(yàn)較為系統(tǒng)地研究了牛奶中乳鐵蛋白含量的變化規(guī)律及其影響因素，共包括以下五部分： 第一部分：試驗(yàn)中共采集36頭荷斯坦奶牛初乳奶樣、利用夾心ELISA方法檢測乳中乳鐵蛋白的絕對含量，同時(shí)通過SDS-PAGE進(jìn)行相對定量分析，來研究初乳中乳鐵蛋白含量的變化規(guī)律。結(jié)果表明：初乳中乳鐵蛋白含量變化較大，尤其是分娩后24h內(nèi)下降明顯，從1.315mg/mL降至0.655mg/mL。 第二部分：從北京4個(gè)奶牛場中，通過連續(xù)跟蹤奶牛

2、乳中體細(xì)胞數(shù)的變化，選擇出處于正常泌乳期內(nèi)，且兩個(gè)月內(nèi)無乳房炎臨床癥狀的荷斯坦奶牛198頭。記錄奶牛的產(chǎn)奶量同時(shí)收集奶牛的個(gè)體樣品。通過夾心ELISA方法檢測乳中乳鐵蛋白的含量，從而確定牛奶中乳鐵蛋白含量的影響因素，這些因素包括奶牛胎次、泌乳階段、產(chǎn)奶量以及體細(xì)胞數(shù)等。結(jié)果顯示，正常奶牛乳中乳鐵蛋白含量在31.78～485.63ug/mL之間；乳鐵蛋白含量主要受奶牛泌乳階段和產(chǎn)奶量的影響，與奶牛胎次無關(guān)，同時(shí)，乳中乳鐵蛋白含量與SCS密

3、切相關(guān)。這一研究結(jié)果表明，牛奶中乳鐵蛋白含量也許對于奶牛乳房炎的檢測有所幫助。 第三部分：本試驗(yàn)共選用128頭奶牛，通過直接測序方法，我們在奶牛乳鐵蛋白基因啟動(dòng)區(qū)共發(fā)現(xiàn)6個(gè)SNP，其中2個(gè)SNP是首次發(fā)現(xiàn)。通過最小二乘，我們分析了這6個(gè)SNP所組成的基因型以及單倍體型對乳中乳鐵蛋白含量、體細(xì)胞數(shù)的影響。結(jié)果顯示，乳鐵蛋白的含量以及體細(xì)胞數(shù)主要受奶牛所處泌乳月的影響，與奶牛胎次、乳鐵蛋白基因型、乳鐵蛋白單倍體型關(guān)系不大(P＞0.0

4、5)。 第四部分：本試驗(yàn)?zāi)康氖峭ㄟ^埋置抗原緩釋劑ARD，從而使奶牛產(chǎn)生免疫反應(yīng)，從而檢測免疫條件下牛奶以及血清中乳鐵蛋白含量的變化。試驗(yàn)共選擇40頭健康荷斯坦奶牛，根據(jù)奶牛胎次、泌乳日齡以及產(chǎn)奶量劃分為試驗(yàn)組和對照組，試驗(yàn)組進(jìn)行埋置ARD處理，對照組不埋置ARD。通過ELISA方法檢測血清以及乳中乳鐵蛋白的含量。結(jié)果顯示，埋置ARD不能顯著提高整個(gè)試驗(yàn)期內(nèi)血清以及乳中乳鐵蛋白的含量，但是顯著提高了乳中7d和血清11d時(shí)的含量P＜

5、0.05)。乳中乳鐵蛋白含量與血清中乳鐵蛋白含量存在很強(qiáng)的相關(guān)性(r=0.564，P＜0.01)。ARD中三個(gè)抗原的釋放時(shí)間是0d、14d和28d，抗原的首次釋放顯著提高了乳鐵蛋白的含量，由此說明乳鐵蛋白可能參與了體內(nèi)的初期免疫應(yīng)答過程。 第五部分：本試驗(yàn)以小鼠為動(dòng)物模型來研究免疫條件下，乳腺內(nèi)乳鐵蛋白基因mRNA表達(dá)量的變化。選擇120只健康昆明小白鼠，分別于分娩后4d進(jìn)行如下處理：A組注射滅菌生理鹽水，B組注射Lipase+