社區(qū)獲得性腹瀉病原菌耐藥性及鼠傷寒沙門菌對喹諾酮類藥物耐藥機制的研究.pdf

1、目的和意義 調(diào)查武漢社區(qū)獲得性腹瀉病原菌的構(gòu)成及其主要病原菌—鼠傷寒沙門菌對喹諾酮類藥物的耐藥情況，并對其主要耐藥機制和耐藥基因型進(jìn)行研究。闡明武漢社區(qū)獲得性腹瀉病原菌對常用抗菌藥物的耐藥性及鼠傷寒沙門菌的分子流行病學(xué)特征，為指導(dǎo)臨床合理用藥，新藥研究及疫苗開發(fā)提供科學(xué)依據(jù)。 方法 收集2004年6月30日～2004年10月31日武漢地區(qū)四所大型醫(yī)院門診腹瀉患者糞便標(biāo)本4536份，無菌棉拭子挑取可疑部分，立即插入

2、卡—布運送培養(yǎng)基中，當(dāng)天接種，以木糖賴氨酸脫氧膽酸鹽培養(yǎng)基、麥康凱培養(yǎng)基、改良半固體氯化鎂孔雀綠培養(yǎng)基、賴氨酸鐵培養(yǎng)基分離鑒定病原菌。瓊脂稀釋法檢測細(xì)菌對喹諾酮類藥物的最低抑菌濃度(miniminhibitionconcentration，MIC)，并抽提鼠傷寒沙門菌的基因組DNA，聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(polymerasechainreaction，PCR)方法檢測喹諾酮類抗菌藥物作用于鼠傷寒沙門菌的靶位點。重復(fù)基因外回文序列聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)

3、(repetitiveextragenicpalindromicsequencespolymerasechainreaction,REP-PCR)對32株鼠傷寒沙門菌進(jìn)行基因分型，并與生物學(xué)分型和耐藥結(jié)果比較。 結(jié)果 4536份糞便標(biāo)本中，分離出非傷寒沙門菌64株(1.4％)，志賀菌29株(0.6％)，致病性大腸桿菌33株(0.7％)，在非傷寒沙門菌中鼠傷寒沙門菌占51.6％(33株)。非傷寒沙門菌、志賀菌和致病性大腸桿

4、菌對環(huán)丙沙星的耐藥率分別為39.1％，6.9％和12.1％；它們對氨芐西林、四環(huán)素、萘啶酸和復(fù)方新諾明的耐藥率都超過50％；非傷寒沙門菌對第三代頭孢菌素的耐藥率＜5％，仍保持較好的敏感性。 33株鼠傷寒沙門菌對環(huán)丙沙星的耐藥率為72.7％，MIC值達(dá)4～16ug/ml。24株對環(huán)丙沙星耐藥的鼠傷寒沙門菌中均存在gyrA位點突變，22株存在gyrA和parC雙重突變。本實驗選取數(shù)株各個水平MIC值的鼠傷寒沙門菌進(jìn)行分析，未見gyr

5、B和parE位點發(fā)生突變，但發(fā)現(xiàn)可疑堿基插入。采用REP-PCR技術(shù)對32株鼠傷寒沙門菌進(jìn)行基因分型，獲得a、b、c、d、e、f、g、h、x共9型，其中以a型為主共19株(59.4％)，為主要流行株。 結(jié)論 武漢地區(qū)社區(qū)感染性腹瀉的病原菌以非傷寒沙門菌為主，其中鼠傷寒沙門菌占非傷寒沙門菌的51％，其次是致病性大腸桿菌和志賀菌。這些致病菌對腸道桿菌常用抗菌藥物如氨芐西林、復(fù)方新諾明的耐藥率超過50％。鼠傷寒沙門菌感染對喹諾