DAPK和FHIT基因啟動(dòng)子甲基化檢測(cè)在血液系統(tǒng)腫瘤中的意義.pdf

1、目的： 研究造血系統(tǒng)腫瘤骨髓增生異常綜合征(myelodysplastic syndrome，MDS)、急性髓細(xì)胞性白血病(acute myeloid leukemia，AML)和慢性髓細(xì)胞性白血病(chronic myeloid Leukemia，CML)患者中死亡相關(guān)蛋白激酶(death-associated protein kinase，DAPK)和脆性組氨酸三聯(lián)基因(fragile histidine triad，F(xiàn)HI

2、T啟動(dòng)子區(qū)域的甲基化狀況及其臨床相關(guān)性。 方法： 建立甲基化特異性PCR(methylation-specific PCR，MSP)技術(shù)并對(duì)59例不同階段MDS患者、112例AML患者和49例CML患者骨髓標(biāo)本的DAPK基因甲基化狀態(tài)進(jìn)行檢測(cè)，對(duì)54例不同階段MDS患者骨髓標(biāo)本的FHIT基因甲基化狀態(tài)進(jìn)行檢測(cè)，分析DAPK和FHIT基因甲基化狀態(tài)與患者的臨床相關(guān)性。 結(jié)果： 59例MDS患者中37例(62

3、.7％)發(fā)生DAPK基因甲基化，DAPK基因甲基化改變與患者的年齡、血象、染色體異常等結(jié)果均無(wú)相關(guān)性，但與患者性別、骨髓原始細(xì)胞比例具有顯著的相關(guān)性(R值分別為0.332和0.346，P值分別為0.010和0.010)。DAPK基因甲基化頻率在難治性貧血(refractory anemia，RA) (2/5例，40.0％)、伴多系病態(tài)造血的難治性血細(xì)胞減少癥(refractory cytopeniawith multilineage d

4、ysplasia，RCMD)和伴環(huán)形鐵粒幼細(xì)胞的RCMD(refractory cytopenia with multilineage dysplasia with ringed blasts，RCMD-RS)(12/22例，54.5％)、難治性貧血伴有原始細(xì)胞增多-1型(refractory anemia with excess blasts-1，RAEB-1)(8/10例，80.O％)、難治性貧血伴原始細(xì)胞增多-2型(refract

5、ory anemia with excess blasts-2，RAEB-2)(9/11例，81.8％)、難治性貧血伴有原始細(xì)胞增多轉(zhuǎn)化型/急性髓細(xì)胞性白血病(refractory anemia with excess blasts in transformation/acute myeloid leukemia，RAEBt/AML)(6/8例，75.O％)和5q-綜合征(0/3例，O％)之間的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(x2=10.288，P=

6、O.067)，但5q-綜合征、原始細(xì)胞正常組(RA/RCMD)和原始細(xì)胞增高組(RAEB-l/RAEB-2/AML)之間的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(x2=9.824，p=O.007)，并且IPSS中高危組(Int-1/Int-2/High)患者中DAPK甲基化頻率明顯高于低危組(Low)(分別為35/51例和1/7例，p=0.010)。 112例AML患者中82例(73.2％)發(fā)生DAPK基因甲基化，DAPK基因甲基化改變與患者的性別

7、、年齡、白細(xì)胞、血紅蛋白、血小板計(jì)數(shù)、染色體異常類(lèi)型等結(jié)果均無(wú)相關(guān)性(p＞0.05)。AML各亞型中的DAPK基因甲基化頻率分別為66.7％(14/21例，M1)、72.5％(29/40例，M2)、69.2％(9/13例，M3)、90.O％(18/20例，M4)、66.7％(8/12例，M5)、66.7％(4/6例，M6)，DAPK甲基化頻率與AML分型之間無(wú)相關(guān)性(p＞O.05)。 49例CML患者中25例(51.O％)發(fā)生D

8、APK基因甲基化，DAPK基因甲基化改變與患者的年齡、白細(xì)胞、血紅蛋白、血小板計(jì)數(shù)、染色體異常類(lèi)型等結(jié)果均無(wú)相關(guān)性(P＞O.05)，但與患者的性別具有顯著的相關(guān)性(R=O.374，P=O.008)。BAPK基因甲基化頻率與CML分期之間具有顯著的相關(guān)性(R=0.354，P=0.013)，甲基化頻率在CML各期之間的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(x2=8.659，P=0.013)，加速期和急變期患者中DAPK基因甲基化頻率明顯高于慢性期患者(x2=

9、7.776，P=0.005)。 54例MDS患者中26例(48.1％)發(fā)生FHlT基因甲基化，F(xiàn)HIT基因甲基化改變與患者的性別、血象、染色體異常等結(jié)果均無(wú)相關(guān)性，但與患者年齡具有顯著的相關(guān)性(R=0.291，P=0.033)。FHIT基因甲基化頻率在難治性貧血/伴有環(huán)形鐵粒幼細(xì)胞的難治性貧血(RA/RARS)(1/6例，16.7％)、RCMD和RCMD-RS(6/19例，31.6％)、RAEB-1(7/11例，63.6％)、R

10、AEB-2(4/7例，57.1％)和RAEBt/AML(8/11例，72.7％)之間的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(x2=8.417，p=0.077)，但早期階段(RA/RARS和RCMD)、晚期階段(RAEB-1和RAEB-2)以及RAEBt/AML患者之間的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(x2=7.938，p=0.019)，并且FHIT丁基因甲基化頻率與IPSS分組預(yù)后危險(xiǎn)程度也具有顯著的正相關(guān)性(x2=10.110，P=0.018)。 結(jié)論：