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文檔簡介
1、目的:①對急性白血病患者中WT1基因第7、8、9、10外顯子區(qū)域點突變的發(fā)生情況進行檢測;②應用基于聚合酶鏈反應(PCR)技術的實驗方法研究部分血液系統(tǒng)腫瘤細胞系中WT1基因啟動子區(qū)域CpG島的DNA甲基化水平,及其與WT1基因表達的相互關系。初步探討血液系統(tǒng)腫瘤中WT1基因功能異常的機制。 方法:①應用PCR-單鏈構象多態(tài)性(PCR-SSCP)技術檢測了68例初診的急性白血病患者(其中AML52例,ALL16例)及100例健康
2、對照者中WT1基因第7、8、9、10外顯子區(qū)域點突變的發(fā)生情況,并對其中發(fā)現(xiàn)異常的標本進行PCR產(chǎn)物直接測序加以驗證;②采用RT-PCR技術及甲基化特異性PCR(MSP)技術檢測8226、HL-60、Jurkat、K562、KG-1、NB4、SHI-1、Raji、U266及U937等血液系統(tǒng)腫瘤細胞系中WT1基因mRNA表達水平及其啟動子區(qū)域的DNA甲基化狀態(tài);③以5-雜氮脫氧胞嘧啶(5-aza-CdR)對實驗中發(fā)現(xiàn)存在基因啟動子區(qū)域D
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