CLEC-1在小膠質細胞活化中作用的研究及CLEC-1促進乳腺癌進展的研究.pdf

1、第一部分 CLEC-1在小膠質細胞活化中作用的研究
　　 中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)損傷后，小膠質細胞靜息狀態(tài)的打破，是小膠質細胞活化并導致CNS內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)破壞，損傷病變加重的關鍵步驟，本部分主要研究小膠質細胞維持靜息狀態(tài)的分子機制。C型凝集素樣受體分子1(C-type lectin-likereceptor-1，CLEC-1)是由NKC編碼的一種免疫細胞模式識別受體。最近的研究表明CLEC-1參與調節(jié)Th17的分化，并與大鼠移植物

2、耐受模型中機體的免疫調節(jié)密切相關。
　　 本文首次證實CLEC-1在小膠質細胞表達，并提出在脂多糖(LPS)誘導小膠質細胞活化的過程中，CLEC-1的表達呈動態(tài)改變。過表達外源性的CLEC-1將抑制炎性環(huán)境對小膠質細胞的活化作用。盡管CLEC-1表達的高低在LPS誘導的炎癥反應初期并沒有明顯影響小膠質細胞對一系列細胞因子的釋放，但免疫調節(jié)負性調節(jié)因白介素-10(interleukin-10，IL-10)能顯著上調CLEC-1的水

3、平。同時，在IL-10負反饋調節(jié)Toll樣受體4(Toll like receptor4，TLR4)表達的過程中，外轉CLEC-1明顯抑制LPS對于TLR4的活化。此外，過表達CLEC-1可以促進小膠質細胞凋亡。以上結果提示：CLEC-1可能作為IL-10下游分子負反饋調節(jié)TLR4，并通過促進小膠質細胞的凋亡從而參與對小膠質細胞活化的負性調節(jié)。
　　 綜上所述，本研究發(fā)現(xiàn)CLEC-1是小膠質細胞活化的調節(jié)蛋白。在炎癥因素誘導膠質

4、細胞活化的過程中，CLEC-1可能通過1)參與IL-10的負反饋調節(jié)機制影響TLR4.的表達，2)誘導小膠質細胞的凋亡，在CNS炎癥病程的進展扮演重要的角色。
　　 第二部分 CLEC-1促進乳腺癌進展的研究
　　 乳腺癌的發(fā)病和轉移是一個多步驟、多環(huán)節(jié)、多因素參與的連續(xù)復雜過程。而腫瘤細胞和免疫系統(tǒng)的對話所形成的炎性或免疫狀態(tài)呈負性的微環(huán)境格局，在調控腫瘤的轉移和進展方面有重要的作用。CLEC-1是模式識別受體C型凝集

5、素樣受體家族的一員，之前的研究顯示，CLEC-1在體外大鼠樹突狀細胞表達的抑制可能增加T細胞異體的Th17分化，減少調節(jié)性Foxp3+T細胞數(shù)量，提示它與負性免疫調節(jié)相關。但到目前為止。CLEC-1在腫瘤發(fā)生中的作用迄今為止仍未見報道，它在乳腺癌的發(fā)生發(fā)展過程中所扮演的角色尚不明確。
　　 在本部分的研究中，首次發(fā)現(xiàn)CLEC-1在乳腺癌組織中高表達，通過對145例中國婦女乳腺癌標本的分析，發(fā)現(xiàn)CLEC-1表達水平與腫瘤分級、腫瘤

6、大小、淋巴結轉移情況相關。細胞水平的實驗證實：穩(wěn)轉CLEC-1的乳腺癌細胞株MDA-MB-231在軟瓊脂上的成瘤能力比對照組明顯提高；過表達CLEC-1的MDA-MB-231與MCF-7細胞侵襲能力與對照組相比明顯增強；同時，CLEC-1對乳腺癌細胞的增殖、遷移等能力無明顯影響。這些結果與在乳腺癌組織中的發(fā)現(xiàn)一致。進一步的研究表明，轉化生長因子TGF-β能誘導CLEC-1表達，細胞內(nèi)CLEC-1的表達水平與基質金屬蛋白酶MMP-9的表達