槲皮素、沒食子酸對SMMC-7721肝癌細胞PI3K-AKT信號通路影響的探討.pdf

1、研究目的：
　　 探討國醫(yī)大師經驗方“抗癌扶正方”中澤漆的單體槲皮素、沒食子酸在抗肝癌、促進細胞凋亡方面的作用機制。
　　 研究方法：
　　 體外培養(yǎng)肝癌細胞SMMC-7721，順鉑為陽性組，觀察不同濃度槲皮素、沒食子酸對細胞凋亡的作用及其相關機制。采用MTT法檢測槲皮素、沒食子酸對細胞生長的影響，并觀察在不同時間點的細胞形態(tài)；利用流式細胞儀檢測藥物作用后的細胞凋亡情況及細胞周期分布；運用RT-PCR及Weste

2、rnBlot法檢測單體對SMMC-7721細胞PI3K/AKT信號通路相關凋亡蛋白表達的影響。
　　 研究結果：
　　 槲皮素、沒食子酸對人肝癌細胞SMMC-7721增殖有明顯抑制作用，呈濃度依賴性和時間依賴性。流式結果提示，槲皮素可將SMMC-7721細胞周期阻滯于G0/G1期，并且其凋亡率隨濃度增加而逐漸增加；沒食子酸可使SMMC-7721細胞周期阻滯于G0/G1期，凋亡率隨藥物濃度增加的上升趨勢不顯著。細胞形態(tài)觀察

3、，藥物組細胞呈現不規(guī)則形，甚至變圓，體積縮小，細胞結構沒有對照組緊密，某些細胞甚至出現脫落、漂浮現象。RT-PCR、WesternBlot凋亡相關蛋白表達檢測表明，藥物組AKT的表達受抑制，PTEN、Caspase9蛋白的表達率隨著藥物濃度的增加而增加。
　　 研究結論：
　　 槲皮素、沒食子酸均能誘導人肝癌細胞SMMC-7721凋亡，其機制可能是使細胞周期阻滯于G0/G1期，PTEN的過表達抑制AKT活化，激活Casp